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稳定表达基质细胞衍生因子1α的内皮细胞系构建及其与单核细胞的粘附作用
引用本文:吴孟津,王佐,姚峰,李国华,危当恒,唐朝克,姜志胜.稳定表达基质细胞衍生因子1α的内皮细胞系构建及其与单核细胞的粘附作用[J].中国动脉硬化杂志,2007,15(7):484-486.
作者姓名:吴孟津  王佐  姚峰  李国华  危当恒  唐朝克  姜志胜
作者单位:1. 南华大学,法医学教研室,湖南省衡阳市,421001
2. 南华大学,心血管病研究所,湖南省衡阳市,421001
基金项目:中国博士后科学基金;教育部科研项目;湖南省自然科学基金
摘    要:目的构建稳定表达基质细胞衍生因子1α的ECV304细胞系,研究基质细胞衍生因子1α在单核细胞/内皮细胞粘附中的作用。方法将大鼠基质细胞衍生因子1α基因聚合酶链反应产物及质粒载体pcDNA3.1用EcoRⅠ进行酶切,去磷酸化,置于连接反应体系中进行连接,将连接产物氯化钙法转化DH5α菌。氨苄青霉素筛选并扩增阳性菌落,经酶切鉴定插入方向正确后,再用G418筛选、逆转录聚合酶链反应检测基质细胞衍生因子1α浓度,建立稳定转染ECV304细胞系。在6孔板上种植转染基质细胞衍生因子1α基因的ECV304细胞,加THP-1细胞37℃孵育30min,磷酸缓冲液轻洗3遍,去除未粘附细胞,倒置显微镜下计数上、下、左、右、中5个视野,取其平均值得到每个视野粘附单核细胞数。结果经逆转录聚合酶链反应检测证实,稳定表达基质细胞衍生因子1α的ECV304细胞系构建成功,细胞计数表明,转染ECV304细胞系粘附THP-1细胞数是转染空质粒的十几倍,CXCR4单抗基质细胞衍生因子1α多抗均显著减少其粘附力(P<0.01)。结论内源性基质细胞衍生因子1α能促进ECV304细胞与单核细胞的粘附。

关 键 词:病理学与病理生理学  基质细胞衍生因子  粘附  单核细胞  细胞计数  人脐静脉内皮细胞
文章编号:1007-3949(2007)15-07-0484-03
收稿时间:2007-06-06
修稿时间:2007-07-02

Stable Expression Stromal Cell-Derived Factor -1 Alpha Endothelial Cells Line Establishment and it's Adhesion Activity with Monocyte
WU Meng-Jin,WANG Zuo,YAO Feng,LI Guo-Hu,WEI Dang-Heng,TANG Chao-Ke,and JIANG Zhi-Sheng.Stable Expression Stromal Cell-Derived Factor -1 Alpha Endothelial Cells Line Establishment and it''''s Adhesion Activity with Monocyte[J].Chinese Journal of Arteriosclerosis,2007,15(7):484-486.
Authors:WU Meng-Jin  WANG Zuo  YAO Feng  LI Guo-Hu  WEI Dang-Heng  TANG Chao-Ke  and JIANG Zhi-Sheng
Affiliation:1. Department of Foremsic Medicine, 2. Institute of Cardiovascular Disease of Nanhua University, Hengyang 421001, China
Abstract:
Keywords:Stromal Cell-Derived Factor-1 Alpha  Adherence  Monocyte  Cells Number Counting  Human Umbilical Vein Endothelial Cell
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