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四环素tet-off系统调控的DT/VEGF融合基因对肝细胞癌的杀伤效应
引用本文:潘欣,潘卫,倪灿荣,柯重伟,曹广文,戚中田.四环素tet-off系统调控的DT/VEGF融合基因对肝细胞癌的杀伤效应[J].世界华人消化杂志,2000,8(8):867-873.
作者姓名:潘欣  潘卫  倪灿荣  柯重伟  曹广文  戚中田
作者单位:1. 中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室,上海市,200433
2. 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院病理科
3. 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院普外科
摘    要:目的 研究四环素tet-off调控系统对DT390-VEGF165及DT390-VEGFexon7融合基因的调控作用,探索毒素融合基因在调控状态下治疗肝癌的有效途径.方法 构建四环素tet-off调控的DT390一VEGF165或DT390-VEGFexon7融合基因真核表达载体,用脂质体介导转染肝细胞癌HepG2,在四环素有或无的情况下观察肝癌细胞的形态变化,用质粒直接注射法观察构建物对荷肝癌裸鼠的治疗效果.结果 3μg真核表达构建物转染5×105个肝癌细胞/孔(24孔板)96 h后发现,无四环素时转毒素融合基因的细胞存活率为20%,对照细胞存活率为77%;四环素存在时转毒素融合基因的细胞存活率为68%,对照细胞存活率为74%;转染细胞在四环素有或无的情况下经免疫荧光抗体染色均呈现黄绿色荧光,表明融合基因在细胞中得到了表达,且四环素调控系统存在基础量的漏表达;用质粒直接注射瘤体虽可观察到质粒被吸收和表达,但由于表达效率低下,没有明显的治疗效果.结论 四环素调控系统基本上可以控制毒素基因在肝癌细胞中的表达.

关 键 词:肝肿瘤  白喉毒素  克隆  分子  脂质体  基因疗法  四环素  转染

Killing effect of tetracyclinecontrolled expression of DT/VEGF system on liver cell cancer
Xin Pan,Wei Pan,Can Rong Ni,Chong Wei Ke,Guang Wen Cao,Zhong Tian Qi.Killing effect of tetracyclinecontrolled expression of DT/VEGF system on liver cell cancer[J].World Chinese Journal of Digestology,2000,8(8):867-873.
Authors:Xin Pan  Wei Pan  Can Rong Ni  Chong Wei Ke  Guang Wen Cao  Zhong Tian Qi
Abstract:
Keywords:
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