| pEGFP-restin重组质粒的构建及其在BGC-803胃癌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 戴聪,李锦毅.pEGFP-restin重组质粒的构建及其在BGC-803胃癌细胞中的表达[J].世界华人消化杂志,2008,16(35):3937-3940. |
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| 作者姓名： | 戴聪 李锦毅 |
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| 作者单位： | 1. 辽宁医学院研究生院,辽宁省,锦州市,121001
2. 武警总医院临床教研室,北京市,100039 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建一种含人肿瘤休眠蛋白基因(restin)的质粒,以绿色荧光蛋白作为报告基因,观察其在胃癌细胞中的表达,为探讨其抗肿瘤作用的分子机制打下基础.方法:从人胚肾组织中,以RT-PCR方法扩增restin基因片段,将restin片段和增强型绿色荧光表达质粒pEGFP-C1酶切、纯化、连接、转化、筛选,构建pEGFP-restin重组质粒,转染胃癌细胞,荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达,并对表达产物进行Western blot鉴定.结果:RT-PCR产物经琼脂糖电泳,在预期位置(600 bp)处阳性条带表达;重组载体经酶切分析,插入片段表达restin基因;pEGFP-restin重组质粒成功转染胃癌细胞,在荧光显微镜下强绿色荧光蛋白表达,Western blot鉴定结果显示pEGFP-restin上的restin基因在BGC-803细胞中正确表达.结论:成功构建了pEGFP-restin重组质粒,为进一步研究restin的功能提供了重要的实验材料.
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| 关 键 词： | 休眠基因 绿色荧光蛋白 质粒构建 基因转染 胃癌 |
Construction of pEGFP-restin recombinant plasmid and its expression in BGC-803 gastric Cancer cells |
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| Cong Dai,Jin-Yi Li.Construction of pEGFP-restin recombinant plasmid and its expression in BGC-803 gastric Cancer cells[J].World Chinese Journal of Digestology,2008,16(35):3937-3940. |
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| Authors: | Cong Dai Jin-Yi Li |
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