| 应用免疫磁珠分离法及荧光定量PCR技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157：H7 |
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| 引用本文： | 王涛,刘凯,王艳,綦廷娜,叶长芸,熊衍文.应用免疫磁珠分离法及荧光定量PCR技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157：H7[J].中国人兽共患病杂志,2011,27(4):291-293,315. |
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| 作者姓名： | 王涛 刘凯 王艳 綦廷娜 叶长芸 熊衍文 |
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| 作者单位： | 王涛,綦廷娜,WANG Tao,QI Ting-na(贵阳医学院微生物学教研室,贵阳,550004);刘凯,王艳,叶长芸,熊衍文,LIU Kai,WANG Yan,YE Chang-yun,XIONG Yan-wen(中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京,102206) |
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| 基金项目： | 国家"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项(2009ZX10004-101)资助 |
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| 摘 要： | 目的建立免疫磁珠分离法（immunomagnetic separation,IMS）联合荧光定量PCR（real-time PCR）技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time PCR检测体系,并检测其特异性及敏感性;用O157免疫磁珠特异性捕获标本菌液中的O157∶H7大肠埃希菌,结合real-time PCR对磁珠捕获菌细胞的DNA进行检测分析。结果 Real-time PCR检测结果显示,O157∶H7大肠埃希菌可产生荧光信号,而其他常见致病菌均未见明显荧光信号;采用IMS-real-time PCR方法检测标本,菌液含菌量为3.3×102CFU/mL时即可被检出,检测全过程需时约4h。结论 IMS-real-time PCR检测方法具有特异性强、敏感度高、快速易操作等特点,该检测方法能提高O157∶H7大肠埃希菌的检出率和准确性,可用于标本的快速诊断、疾病监测和暴发疫情的病原学调查。
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| 关 键 词： | 免疫磁珠分离法 荧光定量PCR 大肠埃希菌O157∶H7 |
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