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人肺新型抗蛋白酶性保护因子elafin cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建
引用本文:杨捷,周向东.人肺新型抗蛋白酶性保护因子elafin cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建[J].中国老年学杂志,2007,27(7):601-603.
作者姓名:杨捷  周向东
作者单位:重庆医科大学附属第二临床医院呼吸内科,重庆,400010
基金项目:重庆市应用基础研究项目(200332)
摘    要:目的克隆人肺新型抗蛋白酶性保护因子elafin基因cDNA,构建该基因的真核高效表达载体。方法抽提人肺总RNA进行RT-PCR法扩增,产物由pUCm-T载体装载、DNA测序确定后,用双酶切将Elafin cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1,转化于大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定重组质粒。结果经RT-PCR获得400b的产物,经DNA测序,确定所扩增片段为人elafin基因cDNA,进而成功筛选出真核表达载体pEGFP-N1-elafin。结论成功构建人elafin基因cDNA真核表达载体,为进一步深入研究慢性阻塞性肺疾病的发病机制奠定了技术基础。

关 键 词:真核表达载体  克隆
文章编号:1005-9202(2007)07-0601-03
修稿时间:2004年2月25日

The cloning and identification of human new type antiprotease protector elafin gene cDNA and construction of pEGFP-N1-elafin eukaryotic expression vector
YANG Jie,ZHOU Xiang-Dong.The cloning and identification of human new type antiprotease protector elafin gene cDNA and construction of pEGFP-N1-elafin eukaryotic expression vector[J].Chinese Journal of Gerontology,2007,27(7):601-603.
Authors:YANG Jie  ZHOU Xiang-Dong
Abstract:
Keywords:elafin
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