| 锤头状核酶对肝癌突变基因p53的抑制作用 |
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| 引用本文： | 孔心涓,林菊生,宋宇虎,沈霞,金由辛.锤头状核酶对肝癌突变基因p53的抑制作用[J].中华肝脏病杂志,2003,11(12):722-724. |
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| 作者姓名： | 孔心涓 林菊生 宋宇虎 沈霞 金由辛 |
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| 作者单位： | 1. 430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所
2. 中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30171061) |
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| 摘 要： | 目的 探讨p53核酶对肝癌细胞突变型抑癌基因p53的抑制作用。方法 应用计算机设计并合成针对突变型p53(249位密码子AGG→AGT)的锤头状核酶RZ，构建其体外转录和真核表达载体，检测核酶对突变型p53(mtp53)的体外切割作用，并在Lipofect AMINE^TM2000的介导下转染肝癌细胞MHCC97，应用逆转录聚合酶联反应(RT—PCR)检测核酶对肝癌细胞突变型p53的抑制作用。结果 测序证实核酶基因被正确克隆人体外转录载体pBSKU6和真核载体pEGFPC1中。体外切割效率为42％，而野生型p53(wtp53)没有被切割。在Lipofect AMINETM2000的介导下成功转染肝癌细胞MHCC97，RT—PCR检测证实突变型p53的mRNA水平明显下降，细胞内的切割效率为69％。结论 p53核酶可成功抑制肝癌细胞中突变型p53的表达，为肝癌的基因治疗提供了一个新的选择。
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| 关 键 词： | 锤头状核酶 肝癌 基因突变 p53基因 基因治疗 |
| 修稿时间： | 2002年10月15 |
Inhibition of mutant p53 in hepatocellular carcinoma cells by hammerhead ribozyme |
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| KONG Xin-juan,LIN
Ju-sheng,SONG Yu-hu,SHEN Xia,JIN You-xin.Inhibition of mutant p53 in hepatocellular carcinoma cells by hammerhead ribozyme[J].Chinese Journal of Hepatology,2003,11(12):722-724. |
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| Authors: | KONG Xin-juan LIN
Ju-sheng SONG Yu-hu SHEN Xia JIN You-xin |
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| Affiliation: | Institute of Liver Diseases, Tongji Hospital of Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Carcinoma hepatocellular Gene therapy Hammerhead ribozyme Mutant p53 |
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