| 实时荧光定量PCR模板DNA快速制备的方法建立与应用 |
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| 引用本文： | 王忠发.实时荧光定量PCR模板DNA快速制备的方法建立与应用[J].中华预防医学杂志,2009,43(3). |
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| 作者姓名： | 王忠发 |
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| 作者单位： | 浙江省舟山市疾病预防控制中心微生物检验科,316021 |
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| 基金项目： | 浙江省科技厅项目，浙江省卫生厅科研资助项目 |
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| 摘 要： | 实时荧光定量PCR技术于1996年美国AppiedBiosystems公司推出,由于该技术不仅实现PCR从定性到定最的飞跃,而且与常规PCR相比,具有特异性更强、敏感度更高、操作简便快速、可以有效解决常规PCR污染问题等优点1-2],已广泛应用于突发公共卫生事件应急处置中病原体的检测.提高实时荧光定量PCR的检测速度,服务于突发公共卫生事件应急检测是当前备受关注的技术问题.实时荧光定量PCR由模板制备和PCR两部分组成,缩短模板制备时间就可提高实时荧光定量PCR的检测速度.我们研制了一种模板制备方法,使制备时间从原来的30 min以上缩短至5 min以内,制备效果与经典的煮沸裂解法和先进的柱式核酸提取试剂盒相同,用于实时荧光定量PCR可在15～30 min内完成病原体DNA检测.
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