亚洲牛带绦虫TaCRISP基因克隆、表达和序列分析 |
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引用本文: | 戴鹏,戴佳琳,黄江,廖兴江,郎书源,周灵贵,申萍香.亚洲牛带绦虫TaCRISP基因克隆、表达和序列分析[J].中国公共卫生,2009,25(4). |
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作者姓名: | 戴鹏 戴佳琳 黄江 廖兴江 郎书源 周灵贵 申萍香 |
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作者单位: | 1. 贵阳医学院理化实验中心,贵州贵阳,550004 2. 贵阳医学院多媒体形态学实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,贵州省科技攻关项目 |
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摘 要: | 目的 通过筛选亚洲牛带绦虫(Taenia saginata asiatica)成虫cDNA质粒文库,识别半胱氨酸分泌蛋白(Ta CRISP),并进行克隆表达,为进一步研究其功能提供基础依据.方法 用生物信息学方法从亚洲牛带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别TaCRISP的全长编码基因并预测编码蛋白质的各种结构与功能;将其编码区序列克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,测序鉴定重组质粒,之后进行诱导表达,表达产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定.结果 该基因全长1 090bp,编码239个氨基酸,1aa-16aa位为分泌信号肽,理论分子量为26 973.8,等电点为5.96.生物信息分析揭示,Ta CRISP与中殖孔绦虫CRISP一致性为38%,相似性为54%;所构建的重组体经PCR、双酶切及测序鉴定与目标基因相符.SDS-PAGE结果表明,目的 基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中表达成功.结论 发现亚洲牛带绦虫Ta CRISP基因,成功构建重组原核表达质粒并表达出融合蛋白.
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关 键 词: | 亚洲牛带绦虫 半胱氨酸分泌蛋白 分子克隆 原核表达 序列分析 |
Cloning,expression and sequence analysis of cysteine-rich secretion protein 2 gene from Taenia saginata asiatica |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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