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Nrf 2信号通路在铅致SH-SY5Y细胞氧化应激中作用
引用本文:李平,李芬,叶昉,吕玲,陈军.Nrf 2信号通路在铅致SH-SY5Y细胞氧化应激中作用[J].中国公共卫生,2012,28(7):933-935.
作者姓名:李平  李芬  叶昉  吕玲  陈军
作者单位:华中科技大学同济医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系教育部环境与健康重点实验室,湖北武汉,430030
基金项目:国家自然科学基金,教育部留学回国人员科研启动基金
摘    要:目的研究神经细胞内核因子E 2相关因子2(Nrf 2)信号通路是否对铅暴露所致的氧化应激产生应答及其可能机制。方法用低、中、高剂量(5、25、125μmol/L)的醋酸铅溶液对人神经母细胞瘤SH-SY 5 Y细胞染毒,用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针检测染毒2 h后细胞活性氧(ROS)水平,染毒24 h后用二硫基双硝基苯甲酸(DTNB)比色法检测还原性谷胱甘肽(GSH)水平,western blot法检测蛋白激酶C-δ(PKC-δ)、酪氨酸激酶2(CKⅡ)以及胞浆和胞核中Nrf 2蛋白的表达水平。结果随着染毒剂量增加,低、中、高剂量组ROS含量依次为(559.17±54.56)、(585.50±36.41)、(621.00±29.96),与对照组(533.50±46.47)比较,中、高剂量组含量明显升高(P<0.05);GSH含量依次为(165.39±17.37)、(140.92±14.77)、(84.03±10.31),与对照组(222.10±14.91)比较,低、中、高剂量组含量均明显降低(P<0.01);与对照组比较,低、中、高剂量组胞浆Nrf 2相对灰度值为(0.38±0.09)、(0.27±0.09)、(0.25±0.11),胞浆Nrf 2表达均明显降低(P<0.05);低、中、高剂量组胞核Nrf 2相对灰度值为(1.38±0.50)、(1.55±0.49)、(2.79±1.56),仅高剂量组胞核Nrf 2蛋白表达明显增高(P<0.05)。低、中、高剂量组PKC-δ相对灰度值为(1.84±0.46)、(2.55±0.36)、(2.38±0.77),与对照组比较均明显升高(P<0.05);低、中、高剂量组CKⅡ相对灰度值为(1.28±0.32)、(1.34±0.21)、(1.52±0.42),与对照组比较仅高剂量组表达明显升高(P<0.05)。结论铅致神经细胞氧化损伤的同时激活胞浆中Nrf 2转移入核内,进而发挥氧化应答,PKC-δ、CKⅡ在铅致Nrf 2激活过程中具有一定作用。

关 键 词:  人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞  活性氧(ROS)  还原性谷胱甘肽(GSH)  核因子E  2相关因子2(Nrf  2)  蛋白激酶C-δ(PKC-δ)  酪氨酸激酶2(CKⅡ)

Role of Nrf 2 signal pathway in lead-induced oxidative stress in SH-SY5Y cells
Affiliation:LI Ping,LI Fen,YE Fang,et al(Departemnt of Occupational and Environmental Health,School of Public Health,Tongji Medical College,Huazhong Univesity of Science and Technology,Wuhan 430030,China)
Abstract:
Keywords:lead  SH-SY5Y cell  ROS  GSH  Nrf 2  PKC-δ  CKⅡ
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