高效液相色谱法测定血管紧张素转换酶Ⅰ抑制剂活性的方法学及其应用研究

目的:建立高效液相色谱快速测定血管紧张素转换酶I抑制剂活性的方法。方法:以马尿酰-组胺酰-亮氨酸为底物,血管紧张素转换酶Ⅰ为催化剂,酶促反应产物马尿酸为检测指标,卡托普利为抑制剂的代表进行方法学研究。采用Phenomenex Luna C18色谱柱,流动相为甲醇和乙酸溶液,等度洗脱,检测波长为228 nm。根据保留时间定性,外标峰面积法定量。结果:马尿酸最低检测限为0.01μmol/L,加标回收率为93.8%～103%。应用该方法测得实验室制备的鳕鱼寡肽浓度与其ACE抑制率呈自然对数关系,计算得鳕鱼寡肽对ACE的IC50为4.56 mg/ml。结论:该方法可作为体外测定血管紧张素转换酶抑制剂活性的方法,具有操作简便快捷、精密度和准确性高的特点。