PBMCs HBV逆转录酶mRNA表达与乙型肝炎的临床关系

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）逆转录酶mRNA存外周血单个核细胞（PBMCs）中的表达与乙型肝炎的临床关系。方法选择70例乙型肝炎患者（包括急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化）及10例HBsAg阴性的健康体检者。分别提取其PBMCs中的总RNA，经无RNA酶的DNA酶I消化去除残存的基因组DNA后，逆转录合成cDNA。以HBVP基因区设计合成逆转录酶引物进行PCR扩增，检测HBV逆转录酶的表达情况。对1例阳性标本进行了克隆和测序，将所得序列与Gen．Bank数据库中已知核苷酸序列进行同源性分析。结果所得基因序列为379个核苷酸，与实验设计相符。与HBVadw2亚型标准一级结构比较，同源性为93．7％。对照组无1例HBV逆转录酶mRNA阳性表达；急性乙型肝炎组阳性表达率较低，为5．3％（1／15）；慢性乙型肝炎组阳性表达率为33．3％（12／36），两组阳性率差异有显著统计学意义（P〈0．05）；肝硬化组阳性表达率为26．7％（4／15），与慢性乙型肝炎组比较，阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。PBMCs中HBV逆转录酶mRNA表达阳性组与阴性组肝功能比较，大部分指标差异有显著统计学意义（P〈0．05）。PBMCs中HBV逆转录酶表达阳性率与血清HBeAg、HBVDNA阳性率之间无相关性（r=0．164、，=0．07），其差异均无显著统计学意义（P〉0．05）。另外，乙型肝炎患者中，有家族史者的PBMCs逆转录酶mRNA阳性表达率占37．0％（10／27），而无家族史者的仅占16．3％（7／43），乙型肝炎患者的家族史与PBMCsHBV逆转录酶阳性表达有相关性（r=0．229），差异有显著统计学意义（P〈0．05）。结论HBV逆转录酶在PBMCs中可独立复制，其表达与乙型肝炎的慢性化、重度化及家族聚集性有密切相关性，可为早期诊断指标之一。