| 昆明种小鼠胚胎神经干细胞的分离及培养 |
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| 引用本文： | 宫晓洁,孙莉,黎靖宇,袁路,刘琦,陈维平.昆明种小鼠胚胎神经干细胞的分离及培养[J].中国组织工程研究与临床康复,2008,12(8):1477-1480. |
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| 作者姓名： | 宫晓洁 孙莉 黎靖宇 袁路 刘琦 陈维平 |
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| 作者单位： | 1. 桂林医学院组胚教研室,广西壮族自治区桂林市,541001
2. 广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,530021 |
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| 摘 要： | 目的:在神经干细胞的分离培养过程中,国内外的报道多数是用胰蛋白酶对组织细胞进行消化,但是消化时间比较难把握.采用胰酶消化与机械分离法相结合的方式对昆明种小鼠胚胎脑神经干细胞进行分离、培养和初步的免疫组织化学检测,为相关研究建立实验条件.方法:实验于2006-10/2007-09在广西医科大学基础医学实验室完成.实验室为广西重点实验室、基础医学博士后工作站. ①实验材料:孕14～16 d的昆明种小鼠由广西医科大学实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:分离昆明种小鼠胎鼠的脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,在加入碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的B27无血清培养基中培养.③实验评估:用免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞.结果:在无血清DMEM/F12培养液中,加入碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子及B27的条件下,培养24 h后可见细胞以悬浮方式生长,三五聚集成团块,48 h后形成由十数个至数十个细胞组成的,大小不等的细胞球,形态规则,细胞无突起,形成典型的神经球,可传代.免疫细胞化学法检测显示,细胞表达神经巢蛋白.结论:①来自昆明种小鼠胎脑的神经干细胞能在体外培养、增殖并具有增殖传代能力.②无血清B27培养基添加表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子有利于神经干细胞的体外培养和促进其增殖.
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| 关 键 词： | 神经干细胞 神经球 细胞培养 碱性成纤维细胞生长因子 表皮细胞生长因子 昆明种小鼠 胚胎神经干细胞 分离 培养基 mouse embryo Kunming neural stem cells culture 添加 能力 增殖 体外培养 神经巢蛋白 细胞表达 检测显示 免疫细胞化学法 神经球 规则 形态 大小 |
| 文章编号： | 1673-8225(2008)08-01477-04 |
| 修稿时间： | 2007年10月10 |
Isolation and culture of neural stem cells from Kunming mouse embryo |
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| Gong Xiao-jie,Sun Li,Li Jing-yu,Yuan Lu,Liu Qi,Chen Wei-ping.Isolation and culture of neural stem cells from Kunming mouse embryo[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2008,12(8):1477-1480. |
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| Authors: | Gong Xiao-jie Sun Li Li Jing-yu Yuan Lu Liu Qi Chen Wei-ping |
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