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| 人骨保护素基因重组腺病毒载体在大鼠骨髓基质细胞中的表达效率 | |
| 引用本文： | 王晓军,王爱民,张忠荣,吴思宇,郭庆山,贺伟峰,汤守营,张全顺.人骨保护素基因重组腺病毒载体在大鼠骨髓基质细胞中的表达效率[J].中国组织工程研究与临床康复,2005,9(34):4-7. |
| 作者姓名： | 王晓军 王爱民 张忠荣 吴思宇 郭庆山 贺伟峰 汤守营 张全顺 |
| 作者单位： | 1. 解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创中心骨创伤科,重庆市,400042;解放军第二五一医院骨科,河北省 张家口市,075000 2. 解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创中心骨创伤科,重庆市,400042 3. 解放军第三军医大学西南医院烧伤研究所,重庆市,400038 4. 解放军第二五一医院骨科,河北省 张家口市,075000 |
| 摘 要： | 目的:构建人骨保护素基因的重组腺病毒载体,并观察在大鼠骨髓基质细胞中的转染能力及表达效率。方法:实验于2004-03/2005-04在第三军医大学完成。采用基因工程技术,将人骨保护素基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-巨细胞病毒上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携带人骨保护素基因的重组腺病毒,将携带人骨保护素基因重组腺病毒对大鼠骨髓基质细胞进行感染。采用聚合酶链反应方法对重组腺病毒载体进行鉴定,利用绿色荧光报告基因转染结果,以荧光计数法检测重组腺病毒的滴度,应用Westernblot及酶联免疫吸附法检测骨保护素在大鼠骨髓基质细胞中的表达。结果:①酶切鉴定及聚合酶链反应结果证明人骨保护素基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度可达2.5×109pfu/mL,具有很强感染能力。②人骨保护素基因重组腺病毒载体转染大鼠骨髓基质细胞后48h,Westernblot及酶联免疫吸附法可检测到人骨保护素的蛋白表达。结论:应用细菌内同源重组法,可成功构建含人骨保护素基因重组腺病毒载体,且能高效转染大鼠骨髓基质细胞。 |
| 关 键 词： | 腺病毒科 基因疗法 大鼠 |
| 文章编号： | 1671-5926(2005)34-0004-04 |
| 修稿时间： | 2005年4月9日 |
Expressive efficiency of recombinant adenovirus vector of human osteoprotegerin gene in bone marrow stroma cell in rats |
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| Wang Xiao-jun,Wang Ai-min,Zhang Zhong-rong,Wu Si-yu,Guo Qing-shan,He Wei-feng,Tang Shou-ying,Zhang Quan-shun.Expressive efficiency of recombinant adenovirus vector of human osteoprotegerin gene in bone marrow stroma cell in rats[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2005,9(34):4-7. | |
| Authors: | Wang Xiao-jun Wang Ai-min Zhang Zhong-rong Wu Si-yu Guo Qing-shan He Wei-feng Tang Shou-ying Zhang Quan-shun |
| Abstract: | |
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