| 摘 要： | 目的:探讨PTEN基因对甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)细胞生长、周期的影响以及作用机制。方法:使用酶切酶连的方法构建真核表达载体pcDNA3.1-PTEN,采用脂质体转染法将其转入pA10RP8细胞中。实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞内PTEN表达水平的变化,Western印迹法检测PTEN,Ki-67,p21,cyclinD1蛋白表达水平的变化;CCK-8法和平板克隆试验检测PTEN对pA10RP8细胞增殖的影响;细胞流式术检测pA10RP8细胞周期的变化。结果:成功构建了PTEN真核表达载体。转染pcDNA3.1-PTEN质粒的pA10RP8细胞PTEN和p21表达上调,Ki-67和cyclin D1蛋白表达下调;转染pcDNA3.1-PTEN质粒的pA10RP8细胞生长增殖受到抑制;细胞在G0/G1期比例增加,发生周期阻滞。结论:过表达PTEN能够抑制pA10RP8细胞的增殖,诱导细胞周期阻滞,其机制可能与周期蛋白p21上调和cyclin D1下调表达有关。
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