| 小鼠IL-12单链融合基因真核表达质粒构建及其肿瘤基因治疗初探 |
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| 引用本文： | 王丽,王润田,王平,姜少灏,张红中,佟慧,李全海,杨丽娟,王蕙芬.小鼠IL-12单链融合基因真核表达质粒构建及其肿瘤基因治疗初探[J].中华微生物学和免疫学杂志,2004,24(2):137-141. |
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| 作者姓名： | 王丽 王润田 王平 姜少灏 张红中 佟慧 李全海 杨丽娟 王蕙芬 |
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| 作者单位： | 050017,石家庄,河北医科大学基础所免疫室 |
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| 摘 要： | 目的 构建小鼠IL 12单链融合基因 (msIL 12 ) ,进行基因治疗初探。方法 用RT PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞总RNA分别获取p4 0cDNA和p35cDNA ,2次PCR引入linker后 ,依次克隆入pcDNA3质粒 ,构建成msIL 12真核表达质粒 (pmsIL 12 ) ;用DEAE dextran法将PEG纯化的pmsIL 12转染COS 7细胞 ,用ELISA法检测其培养上清 (转染上清 )IL 12蛋白含量。皮内注射PEG纯化的pmsIL 12 ,用MTT法检测其对正常小鼠脾细胞NK活性的影响 ,观察其对荷H2 2腹水型肝癌细胞瘤小鼠生存期的影响。结果 所得p35cDNA序列与GenBank登录号M86 6 72完全一致 ;所得IL 12p4 0cDNA序列与GenBank登录号AH0 0 4 85 9报道完全相同 ,除第 10 0 0位碱基是G而不是A(但所编码氨基酸相同 ,都是丝氨酸 )外也与GenBank登录号M86 6 71报道相同。成功构建了小鼠IL 12单链融合基因真核表达质粒pmsIL 12 ,其转染COS 7细胞后的转染上清IL 12蛋白含量达 (2 .5 5± 0 .6 0 )ng ml。皮内注射pmsIL 12后 ,使正常小鼠脾细胞NK活性显著增强 (P <0 .0 1) ,使荷H2 2肝癌细胞瘤小鼠的生存期明显延长(P <0 .0 5 )。结论 构建了小鼠IL 12单链融合基因的真核表达质粒 ,可用于基因治疗研究。
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| 关 键 词： | 白细胞介素-12 基因克隆 融合基因 真核表达 小鼠 |
| 修稿时间： | 2003年5月29日 |
Construction of murine IL-12 eukaryotic expression plasmid of single chain fusion gene and its potential in gene therapy of cancer |
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| WANG Li,WANG Run-tian,WANG Ping,JIANG Shao-hao,ZHANG Hong-zhong,TONG Hui,LI Quan-hai,YANG Li-juan,WANG Hui-fen.Construction of murine IL-12 eukaryotic expression plasmid of single chain fusion gene and its potential in gene therapy of cancer[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2004,24(2):137-141. |
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| Authors: | WANG Li WANG Run-tian WANG Ping JIANG Shao-hao ZHANG Hong-zhong TONG Hui LI Quan-hai YANG Li-juan WANG Hui-fen |
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| Affiliation: | WANG Li,WANG Run-tian,WANG Ping,JIANG Shao-hao,ZHANG Hong-zhong,TONG Hui,LI Quan-hai,YANG Li-juan,WANG Hui-fen. Department of Immunology,Institute of Basic Medical Sciences,Hebei Medical University,Shijiazhuang 050017,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interleukin-12 Gene cloning Fusion gene Eukaryotic expression Mouse |
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