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细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31的GST融合蛋白原核表达及纯化
引用本文:张立民,傅玉才,由弘,王进成.细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31的GST融合蛋白原核表达及纯化[J].寄生虫与医学昆虫学报,2003,10(3):134-138.
作者姓名:张立民  傅玉才  由弘  王进成
作者单位:1. 汕头大学医学院寄生虫学教研室,广东,汕头,515031
2. 新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆,乌鲁木齐,830000
基金项目:国家自然科学基金资助项目,编号 30 1 70 71 0
摘    要:目的 :构建细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31重组质粒 ,表达及纯化EgA31 GST融合蛋白 ,为疫苗的研究奠定基础。方法 :PCR扩增EgA31cDNA ,将得到的cDNA经限制性内切酶酶切 ,然后亚克隆入pGEX 5X 3质粒 ,转化BL2 1宿主菌 ,IPTG诱导重组质粒的表达 ,亲和层析纯化表达产物 ,Bradford法测定重组蛋白含量 ,用SDS PAGE和Westernblot进行分析鉴定。结果 :SDS PAGE显示分离纯化的EgA31 GST融合蛋白为 4 5kDa ,测序检验重组质粒中EgA31cDNA序列正确。EgA31 GST融合蛋白免疫豚鼠得到的抗血清可与细粒棘球绦虫原头蚴总蛋白在 6 6kDa处特异性反应。结论 :EgA31 GST融合蛋白获得高效表达 ,并成功纯化 ,初步实验证明具有良好的免疫原性 ,可用于进一步疫苗的免疫注射实验

关 键 词:细粒棘球绦虫  EgA31融合蛋白  疫苗
修稿时间:2003年3月3日

EXPRESSION AND PURIFICATION OF EGA31 IN ESCHERICHIA COLI
Zhang Limin,Fu Yucai,You Hong,Wang Jincheng.EXPRESSION AND PURIFICATION OF EGA31 IN ESCHERICHIA COLI[J].Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica,2003,10(3):134-138.
Authors:Zhang Limin  Fu Yucai  You Hong  Wang Jincheng
Affiliation:Zhang Limin 1 Fu Yucai 1 You Hong 2 Wang Jincheng 2 1 Department of Parasitology,Shantou University Medical College,Shantou 515031 2 Veterinary Research Insititute,Xinjiang Academy of Animal and Veterinary Sciences,Urumqi 830000
Abstract:
Keywords:Echinococcus granulosus    EgA31 fusion protein  Vaccine
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