| β2M-绿色荧光蛋白在MHC-Ⅰ肽亲和力实验中的应用 |
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| 引用本文： | 熊锐华,王昊亮,邹丽云,李景怡,张晋宇,张荣华,万瑛.β2M-绿色荧光蛋白在MHC-Ⅰ肽亲和力实验中的应用[J].免疫学杂志,2009,25(4). |
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| 作者姓名： | 熊锐华 王昊亮 邹丽云 李景怡 张晋宇 张荣华 万瑛 |
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| 作者单位： | 熊锐华,李景怡,XIONG Ruihua,LI Jingyi(第三军医大学,基础医学部全军免疫学研究所;第三军医大学,西南医院中医科);王昊亮,邹丽云,张晋宇,万瑛,WANG Haoliang,ZOU Liyun,ZHANG Jingyu,WAN Ying(第三军医大学,基础医学部全军免疫学研究所);张荣华,ZHANG Ronghua(第三军医大学,西南医院中医科) |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的 构建并表达β2微球蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白,并应用该蛋白建立一种全新的MHC-Ⅰ肽亲和力实验方法.方法 构建β2M-ZsGreen-6×His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化,将该融合蛋白与表位肽共同与,12细胞反应,通过流式细胞术检测T2细胞标记绿色荧光的情况鉴定表位.结果 构建了B2微球蛋白-绿色荧光蛋白真核表达质粒并表达、纯化得到融合蛋白,该蛋白可应用于亲和力实验,进行表位鉴定.结论 β2微球蛋白-绿色荧光融合蛋白应用于亲和力实验鉴定CTL表位方法可行,步骤简便,适用于大通量表位鉴定.
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白 融合蛋白 亲和力标记物 T细胞表位 |
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