| Rab4蛋白参与DC细胞内源性抗原递呈 |
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| 引用本文： | 柴琳琳,万瑛,邹丽云,张晋宇,李娜,刘婷,李景怡,吴玉章.Rab4蛋白参与DC细胞内源性抗原递呈[J].免疫学杂志,2007,23(3):239-242,247. |
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| 作者姓名： | 柴琳琳 万瑛 邹丽云 张晋宇 李娜 刘婷 李景怡 吴玉章 |
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| 作者单位： | 第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的 建立稳定表达卵白蛋白的DC细胞株DC-OVA,研究Rab蛋白对DC内源抗原递呈的影响.方法 首先构建含OVA蛋白基因慢病毒表达质粒pLentimycOVA;以DNA-磷酸钙共沉淀法转染293FT细胞制备慢病毒,用病毒感染DC2.4细胞及杀稻瘟毒素(Blasticidin)筛选方法建立稳定表达OVA的细胞株,Western blot鉴定DC-OVA细胞中OVA蛋白表达;然后用识别MHC Ⅰ类分子-OVA肽复合物的T细胞杂交瘤B3Z细胞以及针对该复合物的单抗25D1.16检测DC-OVA细胞表面MHC-OVA肽复合物的形成情况,建立内源性抗原呈递的检测方法;最后采用脂质体法转染化学合成的Rab4、Rab5A、Rab7、Rab11的siRNA于DC-OVA中,B3Z检测DC内源抗原递呈的变化.结果 酶切和测序分析证实转移质粒克隆成功,Western blot可在DC-OVA细胞中检测到OVA蛋白,B3Z细胞和25D1.16单抗可检测到DC-OVA细胞表面存在MHCⅠ类分子-OVA表位多肽复合物,表明内源性抗原呈递系统成功建立.在此基础上,发现下调DC细胞中Rab4蛋白的表达,DC-OVA细胞刺激B3Z生成IL-2(白细胞介素2)的量明显下降.结论 成功构建了OVA蛋白的慢病毒表达载体,获得了表达内源OVA蛋白的DC细胞株,建立了内源性抗原呈递系统,初步证实下调Rab4蛋白可抑制DC细胞的内源性抗原递呈,为病毒感染和肿瘤等疾病的治疗奠定了基础.
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| 关 键 词： | DC OVA 内源 抗原递呈 Rab4 白参 白细胞介素 内源性 抗原递呈 dendritic cells presentation 治疗 疾病 肿瘤 表达载体 细胞刺激 发现 系统 多肽复合物 存在 可检测 质粒克隆 转移 测序分析 酶切 |
| 文章编号： | 1000-8861（2007）03-0239-05 |
| 修稿时间： | 2007-01-152007-03-17 |
Rab4 and endogenous antigen presentation in dendritic cells |
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| CHAI Lin-lin,WAN Ying,ZOU Li-yun,ZHANG Jin-yu,LI Na,LIU Ting,LI Jing-yi,WU Yu-zhang.Rab4 and endogenous antigen presentation in dendritic cells[J].Immunological Journal,2007,23(3):239-242,247. |
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| Authors: | CHAI Lin-lin WAN Ying ZOU Li-yun ZHANG Jin-yu LI Na LIU Ting LI Jing-yi WU Yu-zhang |
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| Affiliation: | Institute of Immunology, PLA , Third Military Medical University, Chongqing 400038, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dendritic cell Ovalbumin Endogenous Antigen presentation Rab4 |
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