| 家蚕抗菌肽CD高效表达及其抗BmNPV感染作用 |
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| 引用本文： | 李伟灿,孟小林,徐进平,王健,鲁伟,徐智圣.家蚕抗菌肽CD高效表达及其抗BmNPV感染作用[J].中国病毒学,2006,21(6):589-593. |
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| 作者姓名： | 李伟灿 孟小林 徐进平 王健 鲁伟 徐智圣 |
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| 作者单位： | 武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室,湖北武汉,430072 |
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| 摘 要： | 通过大肠杆菌JM109诱导家蚕,提取其脂肪体总mRNA后,通过RT-PCR 得到 cDNA,根据GenBank上家蚕抗菌肽 Cecropin D 的cDNA序列,设计并合成引物,然后PCR扩增得到 Cecropin D肽基因并克隆到pGEM-T载体中,经过EcoRΙ和 Xho I 酶切,连接并将Cecropin D肽基因插入pET32a表达载体中.用重组质粒pET32a- ecropin D 转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,融合蛋白Trx-Cecropin D 以可溶形式得到高效表达,经SDS-PAGE检测显示分子量为23kDa与预期大小相符,表达量约为总蛋白的30%.融合蛋白经Ni2+ 柱纯化后通过肠激酶切割后释放为 Trx(18kDa)和 Cecropin D (5kDa),最后通过超滤管分离得到重组抗菌肽.通过抑菌实验测得重组CecropinD对于革兰氏阴性及阳性菌均有抑菌活性.并将重组Cecropin D 与家蚕病毒BmNPV作用混合4h后,一起投喂家蚕,发现病毒感染力有明显降低,说明其有抗病毒感染作用.
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| 关 键 词： | 抗菌肽 活性表达 抗BmNPV感染 |
| 文章编号： | 1003-5125(2006)06-0589-05 |
| 修稿时间： | 2006年6月1日 |
High-level Expression of Silkworm Antimicrobial Peptide and Its Anti-infection to BmNPV |
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| LI Wei-can,MENG Xiao-lin,XU Jin-ping,WANG Jiang,LU Wei,XU Zhi-sheng.High-level Expression of Silkworm Antimicrobial Peptide and Its Anti-infection to BmNPV[J].Virologica Sinica,2006,21(6):589-593. |
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| Authors: | LI Wei-can MENG Xiao-lin XU Jin-ping WANG Jiang LU Wei XU Zhi-sheng |
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