‘潘那利’番茄碱性螺旋环螺旋转录因子基因的克隆与表达分析

碱性螺旋环螺旋(basic/Helix Loop Helix, bHLH)转录因子是植物最大的转录因子家族之一，其广泛参与植物逆境胁迫响应。该研究从野生‘潘那利’番茄(Solanum pennellii Correll)中成功克隆出bHLH转录因子基因SpbHLH89(Sol Genomics登录号Sopen04g001150)，采用qRT PCR分析其在干旱胁迫下的表达模式，并利用异源表达初步分析其对非生物胁迫的响应。结果表明：(1)SpbHLH89编码区包含684 bp，编码227个氨基酸，具有典型的碱性螺旋环螺旋区，主要定位于细胞核中；进化树结果显示，SpbHLH89转录因子高度保守，与拟绒毛烟草NtbHLH94(Nicotiana tomentosiformis)存在高度相似性。(2)qRT PCR结果显示，SpbHLH89在‘潘那利’番茄的茎、叶和花中均有表达，其表达量受干旱胁迫诱导。(3)SDS PAGE与Western bloting结果显示，pET 30a SpbHLH89重组蛋白大小约为31 kD。(4)在盐胁迫(400 mmol/L NaCl)和干旱胁迫(600 mmol/L甘露醇)条件下，异源表达重组蛋白的E. coli BL21(DE3)重组菌生长速度提高，说明异源表达SpbHLH89转录因子基因可提高细菌对非生物胁迫的耐受性。