紫苏DGAT1基因克隆及四尾栅藻表达载体构建 |
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引用本文: | 王莹莹,刘玉,姬妍茹,张正海,周广麒,刘宇峰.紫苏DGAT1基因克隆及四尾栅藻表达载体构建[J].生物技术通报,2014(5). |
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作者姓名: | 王莹莹 刘玉 姬妍茹 张正海 周广麒 刘宇峰 |
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作者单位: | 大连工业大学生物工程学院;黑龙江省科学院大庆分院; |
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基金项目: | 大庆市科技计划项目(scyh-2011-76) |
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摘 要: | 利用RNAiso Plus试剂盒提取紫苏总RNA,以其为模板采用RT-PCR方法扩增出紫苏DGAT1基因的cDNA编码区序列并构建克隆载体pMD-DGAT1,再将克隆载体pMD-DGAT1和pBI121空载体进行Xba I和BamH I双酶切,连接目的片段构建表达载体pBI121-DGAT1。结果显示,克隆得到目的片段长度为1 657 bp,与GenBank中紫苏DGAT1基因序列的最大同源性为97%,所构建表达载体pBI121-DGAT1双酶切得到的两条片段长度与连接前一致。结果表明,成功转化四尾栅藻并得到表达,转化后四尾栅藻的油脂含量较转化前提高近1倍。
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关 键 词: | 四尾栅藻 DGAT基因 克隆 表达载体构建 |
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