依赖于DNA的RNA聚合酶与体外转录的研究——Ⅱ.酵母变异株20B-12 RNA聚合酶B的纯化及鉴定 |
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引用本文: | 张渝英,刘年娟,帅克,杨开宇.依赖于DNA的RNA聚合酶与体外转录的研究——Ⅱ.酵母变异株20B-12 RNA聚合酶B的纯化及鉴定[J].菌物学报,1986(2). |
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作者姓名: | 张渝英 刘年娟 帅克 杨开宇 |
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作者单位: | 中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所 北京,北京,北京 北京师范大学84届毕业生,北京 |
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摘 要: | 从酵母变异株20B-12经过超声波处理、硫酸铵沉淀、DEAE纤维素、磷酸纤维素和DEAE-Sephadex层析等步骤,纯化依赖于DNA的RNA聚合酶B,在聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈二条有聚合酶B活力的区带。其中不含有DNase、RNase和蛋白酶活力,无内源DNA。50μg/ml的α-鹅膏蕈碱抑制聚合酶活力达90%以上。最适(NH_4)_2SO_4浓度为40mM。最适Mn~(2 )浓度为2mM。Mg~(2 )对酶B无激活作用。变性DNA对酶B较天然DNA有更高的效率。
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关 键 词: | 依赖于DNA的RNA聚合酶 酿酒酵母变异株20B-12 RNA聚合酶的纯化 |
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