苏云金杆菌δ—内毒素基因在大肠杆菌中的克隆及表达 |
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引用本文: | 田颖川,蔡发兴,王瑛,张斌贤,沙槎云,陈受宜,莽克强.苏云金杆菌δ—内毒素基因在大肠杆菌中的克隆及表达[J].生物工程学报,1989,5(1):11-18. |
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作者姓名: | 田颖川 蔡发兴 王瑛 张斌贤 沙槎云 陈受宜 莽克强 |
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作者单位: | 1.中国科学院微生物研究所,北京;2.中国科学院动物研究所.北京;3.中国科学院生物物理研究所,北 |
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摘 要: | 分离了苏云金杆菌肯尼亚亚种7404(Bacillus huringiensis subsp.Kenyae 7404)和库斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis subsp.Kwrstaki HD-1)的质粒。经凝胶原位杂交证明苏云金杆菌肯尼亚亚种7404的δ—内毒素基因位于约47Md大小的一个质粒上。用蔗糖密度梯度离心法从sau 3 A1部分酶解的上述两种苏云金杆菌质粒DNA酶解片段中分离出大于
4kb的DNA片段,将这些片段克隆到pBR332的Barn HI位点上并转化大肠杆菌HB101。通过菌落原位杂交、菌落原位放射免疫试验及Western blct分析等方法,选到了带有δ—内毒素基因并能在大肠杆菌中表达此毒蛋白的转化体。初步的生物学试验表明,在四个试验过的转化体中带有肯尼亚亚种δ—内毒素基因的转化体TK89及带有库斯塔克亚种δ—内毒素基因的转化体THl2和TH48对烟青虫(Heliothis assulta)有毒杀活性。
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关 键 词: | 苏云金杆菌 DNA克隆 δ-内毒素 |
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