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长效人促卵泡激素CHO细胞株的构建及其体内活性
引用本文:黄晓平,王晓,杨春雪,贾东方,林俊生,刁勇.长效人促卵泡激素CHO细胞株的构建及其体内活性[J].生物工程学报,2014,30(6):954-961.
作者姓名:黄晓平  王晓  杨春雪  贾东方  林俊生  刁勇
作者单位:1 华侨大学分子药物研究院,福建 泉州 362021;2 华侨大学生物医学学院,福建 泉州 362021;1 华侨大学分子药物研究院,福建 泉州 362021;2 华侨大学生物医学学院,福建 泉州 362021;1 华侨大学分子药物研究院,福建 泉州 362021;2 华侨大学生物医学学院,福建 泉州 362021;1 华侨大学分子药物研究院,福建 泉州 362021;2 华侨大学生物医学学院,福建 泉州 362021;1 华侨大学分子药物研究院,福建 泉州 362021;2 华侨大学生物医学学院,福建 泉州 362021;1 华侨大学分子药物研究院,福建 泉州 362021;2 华侨大学生物医学学院,福建 泉州 362021
基金项目:国家自然科学基金 (No. 81271691),国际科技合作项目 (No. 2011DFG33320),福建省科技重大项目 (No. 2013N5007),华侨大学校级基金 (No. 11HZR19) 资助。
摘    要:促卵泡激素(FSH)是具有促进卵泡与睾丸发育作用的一种垂体糖蛋白激素。因其体内半衰期较短,临床上需要连续10 d以上每天注射,病人使用非常不方便。本文旨在通过提高糖基化程度,研制一种长效FSH。通过一段含有两个N-糖基化位点的连接序列,将人FSHα链与β链cDNA融合,并插入pcDNA3.1(+)表达载体。表达载体转染CHO-K1细胞后,通过G418筛选得到阳性单克隆细胞,并经PCR和Western blotting证实。该重组FSH为单链蛋白,分子量约为49 kDa。经无血清培养,工程细胞株培养上清液中重组FSH的表达量可达3 mg/L。单次注射该重组FSH能够促进大鼠卵巢发育与卵泡成熟,且药效与连续8次注射Folltropin-V的相近。实验结果显示,本研究已成功获得一种长效重组FSH。

关 键 词:促卵泡激素  CHO-K细胞  长效  无血清培养
收稿时间:2013/9/12 0:00:00

Expression of human long-acting FSH in CHO cell and its bioactivity in vivo
Xiaoping Huang,Xiao Wang,Chunxue Yang,Dongfang Ji,Junsheng Lin and Yong Diao.Expression of human long-acting FSH in CHO cell and its bioactivity in vivo[J].Chinese Journal of Biotechnology,2014,30(6):954-961.
Authors:Xiaoping Huang  Xiao Wang  Chunxue Yang  Dongfang Ji  Junsheng Lin and Yong Diao
Affiliation:1 Institute of Molecular Medicine, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China; 2 School of Biomedical Sciences Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China;1 Institute of Molecular Medicine, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China; 2 School of Biomedical Sciences Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China;1 Institute of Molecular Medicine, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China; 2 School of Biomedical Sciences Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China;1 Institute of Molecular Medicine, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China; 2 School of Biomedical Sciences Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China;1 Institute of Molecular Medicine, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China; 2 School of Biomedical Sciences Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China;1 Institute of Molecular Medicine, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China; 2 School of Biomedical Sciences Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian, China
Abstract:
Keywords:follicle-stimulating hormone  Chinese hamster ovary cells  long acting  serum-free culture
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