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汉滩病毒截短S基因重组梭菌载体构建及表达
引用本文:张艳丽,王斌,丁守怡,钱冬萌,闫志勇,宋旭霞.汉滩病毒截短S基因重组梭菌载体构建及表达[J].生物技术,2008,18(2):13-15.
作者姓名:张艳丽  王斌  丁守怡  钱冬萌  闫志勇  宋旭霞
作者单位:青岛大学医学院微生物学教研室,青岛市医药生物技术重点实验室,山东,青岛,266071
基金项目:山东省重点医药科技攻关计划项目 , 泰山学者工程项目
摘    要:目的:构建含汉滩病毒截短核蛋白基因的重组质粒,并在口服疫苗载体产气荚膜梭菌中表达。方法:以质粒pGEX-4T-2/SA为模板,PCR扩增汉坦病毒截短核蛋白(SA)基因片断,克隆入穿梭载体pJRC200,构建重组质粒pJRC200-SA,转化E.coliDH5α,酶切鉴定。将pJRC200-SA电穿孔转化产气荚膜梭菌,厌氧培养,促芽孢形成诱导蛋白表达。超声裂解产气荚膜梭菌芽孢,对裂解产物进行SDS-PAGE、Western blotting鉴定。结果:酶切、测序表明,SA基因片段被正确插入pJRC200中,Western blotting分析显示SA蛋白成功表达,并能被肾综合征出血热患者阳性血清特异性识别。结论:汉坦病毒截短核蛋白重组克隆构建成功,并能在产气荚膜梭菌中成功表达,为口服疫苗研发奠定了基础。

关 键 词:肾综合征出血热  汉滩病毒  核蛋白  产气荚膜梭菌  疫苗
文章编号:1004-311X(2008)02-0013-03
修稿时间:2007年11月15

Construction of Recombinant Plasmid of Hantaan Virus Truncated S Genome Segment and Its Expression in C.perfringens
ZHANG Yan-li,WANG Bin,DING Shou-yi,QIANG Dong-meng,YAN Zhi-yong,SONG Xu-xia.Construction of Recombinant Plasmid of Hantaan Virus Truncated S Genome Segment and Its Expression in C.perfringens[J].Biotechnology,2008,18(2):13-15.
Authors:ZHANG Yan-li  WANG Bin  DING Shou-yi  QIANG Dong-meng  YAN Zhi-yong  SONG Xu-xia
Abstract:
Keywords:
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