| 含甘露糖异构酶基因植物表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 孙磊,张国军,闫爱玲,徐海英.含甘露糖异构酶基因植物表达载体的构建[J].生物技术,2012,22(4):18-21. |
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| 作者姓名： | 孙磊 张国军 闫爱玲 徐海英 |
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| 作者单位： | 北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系建设专项资金 |
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| 摘 要： | 目的:构建了以manA基因为选择标记的植物表达载体。方法:从大肠杆菌DH5α中克隆出manA基因,连接到质粒pCAMBIA1301的XhoⅠ位点,替换hpt基因,通过酶切和PCR检测了插入片段的正确性,使用XbaⅠ和HindⅢ酶切Gateway载体(pGWCBF)获得含有P35S-T35S-attR1-attR2-CmR-ccdB的结构域,将其插入到表达载体pCAMBIA1301的相应位点中,获得中间表达载体pCAMBIA1301-manA-GW,使用Gateway载体的BP反应与LR反应,将转录因子CBF基因片段整合到载体中。结果:酶切结果表明以甘露糖异构酶基因(manA)为选择标记的植物表达载体pCAMBIA1301-manA-CBF已经构建完成。结论:将构建好的载体用液氮冻融法转化到农杆菌中,可以用于葡萄的遗传转化研究,为将来获得安全的转基因抗寒植株奠定基础。
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| 关 键 词： | 甘露糖异构酶基因 标记基因 植物表达载体 克隆 |
Construction of Plant Expression Vector with manA Gene |
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| SUN Lei
,
ZHANG Guo-jun
,
YAN Ai-lin
,
XU Hai-ying.Construction of Plant Expression Vector with manA Gene[J].Biotechnology,2012,22(4):18-21. |
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| Authors: | SUN Lei ZHANG Guo-jun YAN Ai-lin XU Hai-ying |
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| Affiliation: | *(Institute of Forestry and Pomology,Beijing Academy of Agricultural and Forestry Sciences,Beijing 100093,China) |
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| Abstract: | |
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