| 敲除组蛋白去乙酰化酶基因hdac对里氏木霉纤维素酶表达的调控作用 |
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| 引用本文： | 张珂珂,周娇娇,佘炜怡,高云雨,邓嘉雯,谢宁,田生礼.敲除组蛋白去乙酰化酶基因hdac对里氏木霉纤维素酶表达的调控作用[J].微生物学通报,2020,47(1):88-96. |
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| 作者姓名： | 张珂珂 周娇娇 佘炜怡 高云雨 邓嘉雯 谢宁 田生礼 |
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| 作者单位： | 深圳大学生命与海洋科学学院 深圳市微生物基因工程重点实验室 广东 深圳 518052,深圳大学生命与海洋科学学院 深圳市微生物基因工程重点实验室 广东 深圳 518052,深圳大学生命与海洋科学学院 深圳市微生物基因工程重点实验室 广东 深圳 518052,深圳大学生命与海洋科学学院 深圳市微生物基因工程重点实验室 广东 深圳 518052,深圳大学生命与海洋科学学院 深圳市微生物基因工程重点实验室 广东 深圳 518052,深圳大学生命与海洋科学学院 深圳市微生物基因工程重点实验室 广东 深圳 518052,深圳大学生命与海洋科学学院 深圳市微生物基因工程重点实验室 广东 深圳 518052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31070044)；深圳市科技基础研究发展计划(ZYC201105130092A) |
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| 摘 要： | 背景]里氏木霉(Trichoderma reesei)是木霉属中产纤维素酶最具代表性的真菌之一,表观遗传调控是不涉及DNA序列变化的可遗传变化,组蛋白去乙酰化是其中一种。组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)负责脱乙酰化,敲除去乙酰化酶基因可引起菌株孢子、菌丝及纤维素酶活性等的一系列改变。目的]通过敲除里氏木霉组蛋白去乙酰化酶基因(histone deacetylase,hdac)建立了里氏木霉hdac缺失突变株(T.reesei△hdac),以研究对纤维素酶基因表达的调控作用。方法]利用Split-Maker技术构建了组蛋白去乙酰化酶基因敲除表达盒,并转化了里氏木霉T.reesei QM9414。经PCR及Southern blotting验证正确后,对突变体T.reesei△hdac连续7 d检测滤纸酶活(filter paper activity,AFP)、羧甲基纤维素钠酶活(carboxymethyl cellulase activity,CMCA),利用RT-qPCR检测纤维素酶及其相关基因cbh1、egl1和xyr1的表达。结果]突变体T.reesei△hdac两种酶活力均显著高于出发菌株,分别高出8.00、30.00 IU/mL。突变体T.reesei△hdac纤维素酶及其相关基因cbh1、egl1和xyr1的转录水平分别为出发菌株T.reesei QM9414的6.50、6.01和4.51倍。结论]里氏木霉中纤维素酶的基因表达明显受到组蛋白去乙酰化酶基因(hdac)的调控,这为研究里氏木霉表观遗传调控对纤维素酶的影响提供了新的证据。
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| 关 键 词： | 里氏木霉 组蛋白去乙酰化酶 基因敲除 突变体 |
Effects of knocking-out histone deacetylase gene hdac on cellulase expression in Trichoderma reesei |
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| ZHANG Ke-Ke,ZHOU Jiao-Jiao,SHE Wei-Yi,GAO Yun-Yu,DENG Jia-Wen,XIE Ning and TIAN Sheng-Li.Effects of knocking-out histone deacetylase gene hdac on cellulase expression in Trichoderma reesei[J].Microbiology,2020,47(1):88-96. |
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| Authors: | ZHANG Ke-Ke ZHOU Jiao-Jiao SHE Wei-Yi GAO Yun-Yu DENG Jia-Wen XIE Ning and TIAN Sheng-Li |
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| Affiliation: | College of Life and Marine Sciences, Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering, Shenzhen University, Shenzhen, guangdong 518052, China,College of Life and Marine Sciences, Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering, Shenzhen University, Shenzhen, guangdong 518052, China,College of Life and Marine Sciences, Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering, Shenzhen University, Shenzhen, guangdong 518052, China,College of Life and Marine Sciences, Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering, Shenzhen University, Shenzhen, guangdong 518052, China,College of Life and Marine Sciences, Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering, Shenzhen University, Shenzhen, guangdong 518052, China,College of Life and Marine Sciences, Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering, Shenzhen University, Shenzhen, guangdong 518052, China and College of Life and Marine Sciences, Shenzhen Key Laboratory of Microbial Genetic Engineering, Shenzhen University, Shenzhen, guangdong 518052, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trichoderma reesei Histone deacetylase Gene knocking-out Mutant |
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