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毕赤酵母发酵生产中的水蛭素降解顺序
引用本文:杨继忠, 周祥山, 解锡军, 尤金花, 张元兴,.毕赤酵母发酵生产中的水蛭素降解顺序[J].微生物学通报,2004,31(5):24-27.
作者姓名:杨继忠  周祥山  解锡军  尤金花  张元兴  
作者单位:1. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;山东东阿阿胶股份有限公司,聊城,252201
2. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237
3. 山东东阿阿胶股份有限公司,聊城,252201
摘    要:水蛭素 (rHV2 Lys4 7)是一个具有 65个氨基酸的抗凝活性肽。在毕赤酵母高密度发酵分泌表达过程中 ,发酵上清中可检出 4个水蛭素活性组份 ,分别为Hir65及其C 末端切除 1~ 3个氨基酸的Hir64、Hir63和Hir62。但目前 4种组份间的衍生关系还不清楚 ,以从发酵上清液中纯化分离所得的 4个组份作为底物 ,加入到菌体裂解液中 ,发现Hir64、Hir63和Hir62组份是由羧肽酶依次降解Hir65肽链C 末端 1个氨基酸后的产物。

关 键 词:毕赤酵母    水蛭素    降解    裂解液  
文章编号:0253-2654(2004)05-0024-04
修稿时间:2003年10月22

Emerging Order of Species of Hirudin in Recombinant Pichia pastoris Fermentation
YANG Ji-Zhong , ZHOU Xiang-Shan XIE Xi-Jun YOU Jin-Hua ZHANG Yuan-Xing.Emerging Order of Species of Hirudin in Recombinant Pichia pastoris Fermentation[J].Microbiology,2004,31(5):24-27.
Authors:YANG Ji-Zhong  ZHOU Xiang-Shan XIE Xi-Jun YOU Jin-Hua ZHANG Yuan-Xing
Affiliation:YANG Ji-Zhong 1,2 ZHOU Xiang-Shan1 XIE Xi-Jun2 YOU Jin-Hua2 ZHANG Yuan-Xing 1*
Abstract:Hirudin (rHV2-Lys 47) is a polypeptide of 65 amino acids, as the most potent and specific inhibitor of thrombin so far known. Four active fractions including the intact rHV2 (Hir65) and its three C-terminally truncated forms, Hir64, Hir63 and Hir62, were purified from the culture supernatant of Pichia pastoris. The emerging order of four species of hirudin was investigated by adding purified Hir65, Hir64 and Hir63 to cell-free extract respectively. Hir64, Hir63 and Hir62 were found to derive from Hir65 by truncating carboxy-terminal amino acid one by one by carboxypeptidase.
Keywords:Pichia pastoris  Hirudin  Degradation  Cell-free extract
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