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人谷胱甘肽S-转移酶pi(GSTp)中半胱氨酸对其在细胞氧化应激下功能的影响
引用本文:司马健,何兰,朱键,薛彬,邰一琳,张双全,殷志敏.人谷胱甘肽S-转移酶pi(GSTp)中半胱氨酸对其在细胞氧化应激下功能的影响[J].分子细胞生物学报,2004,37(3):176-182.
作者姓名:司马健  何兰  朱键  薛彬  邰一琳  张双全  殷志敏
作者单位:南京师范大学生命科学学院 南京210097 (司马健,何兰,朱键,薛彬,邰一琳,张双全),南京师范大学生命科学学院 南京210097(殷志敏)
基金项目:国家自然科学基金(30270527),国家教委留学回国人员主启动基金(2002SWXSBJBC22)~~
摘    要:利用PCR定点突变技术构建人GSTp三种半胱氨酸突变体C~(47/101)、C~(14/47/101)和C~(14/47/101/169)。将CSTp 野生型和突变体表达质粒转染293细胞,以CDNB 为底物测定胞内GST 的转移酶活性,结果显示各类突变体均明显抑制了细胞内源性CST 的催化活性,具有显著的负显性(dominant nega-tive)突变体的功能;将CSTp 野生型和突变体与c-Jun、NF-kB 和p53的报告基因载体共转染,通过萤光素酶活性测定发现突变体C~(14/47/101)和C~(14/47/101/169)能明显激活c-Jun 和p21的转录活性;Western印迹分析显示突变体均能上调细胞内p21蛋白的水平,细胞存活率的测定表明GSTp 突变体能增强293细胞对H_2O_2刺激的敏感性;实验结果表明半胱氨酸残基对于维持GSTp 在对抗细胞氧化应激过程中的保护作用至关重要。

关 键 词:谷胱甘肽S-转移酶pi  半胱氨酸  定点突变  氧化应激  负显性
修稿时间:2003年8月21日

THE EFFECTS OF CYSTEINES ON THE FUNCTION OF HUMAN GLUTATHION S-TRANSFERASE pi(GSTp) UNDER CELL OXIDATIVE STRESS
SIMA Jian HE Lan ZHU Jian XUE Bin TAI Yi Lin ZHANG Shuang Quan YIN Zhi Min.THE EFFECTS OF CYSTEINES ON THE FUNCTION OF HUMAN GLUTATHION S-TRANSFERASE pi(GSTp) UNDER CELL OXIDATIVE STRESS[J].Journal of Molecular Cell Biology,2004,37(3):176-182.
Authors:SIMA Jian HE Lan ZHU Jian XUE Bin TAI Yi Lin ZHANG Shuang Quan YIN Zhi Min
Affiliation:SIMA Jian HE Lan ZHU Jian XUE Bin TAI Yi Lin ZHANG Shuang Quan YIN Zhi Min~**
Abstract:
Keywords:Glutathion S-transferase pi    Cysteine    Site-directed mutagenesis    Oxitative stress    Dominant negative
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