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抗菌肽Pek Ⅱ基因在大肠杆菌中的融合表达及初步纯化
引用本文:朱杰,陈素华,宋珊珊,董先智.抗菌肽Pek Ⅱ基因在大肠杆菌中的融合表达及初步纯化[J].现代生物医学进展,2009,9(4).
作者姓名:朱杰  陈素华  宋珊珊  董先智
作者单位:1. 安徽农业大学生命科学学院,安徽,合肥,230036;中国科学院牛物物理研究所,北京,100101
2. 中国科学院牛物物理研究所,北京,100101
3. 中国科学院牛物物理研究所,北京,100101;中国海洋大学海洋生命学院,山东,青岛,266003
摘    要:目的:研究抗茵肽PekⅡ基因在大肠杆菌中的融合表达并初步纯化.方法:根据大肠杆菌密码子的偏好性,人工设计并合成2段核苷酸序列,退火获得PckⅡ基因;将此基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中,构建成抗茵肽基因PekⅡ融合表达载体pGEX-PekⅡ,转化至大肠杆菌BL21中,用IPTG进行诱导.取超声破碎后的上清经Glutathione SepharoseTM 4亲和层析得到纯化融合蛋白.结果:PCR和测序表明已获得正确PekⅡ编码基因,SDS-PAGE显示29kD处有特异性的蛋白条带出现,纯化得到的GST-PekⅡ经MALDI-TOF MS分析得出其相对分子质量为29553.03.结论:抗菌肽PckⅡ基因在大肠杆菌中的融合表达获得成功,初步纯化得到纯品.

关 键 词:抗菌肽  大肠杆菌  融合蛋白  表达

Fusion Expresson of Pek Ⅱ Gene in Escherichia coli and Its Primary Puritication
ZHU Jie,CHEN Su-hua,SONG Shan-shan,DONG Xian-zhi.Fusion Expresson of Pek Ⅱ Gene in Escherichia coli and Its Primary Puritication[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(4).
Authors:ZHU Jie  CHEN Su-hua  SONG Shan-shan  DONG Xian-zhi
Abstract:
Keywords:
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