| 免疫金银染色法快速检测水产品中孔雀石绿残留的研究 |
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| 引用本文： | 付林峰,汪丽,娄越,简锦明,郭希山,朱松明.免疫金银染色法快速检测水产品中孔雀石绿残留的研究[J].食品安全质量检测技术,2017,8(6):2146-2153. |
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| 作者姓名： | 付林峰 汪丽 娄越 简锦明 郭希山 朱松明 |
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| 作者单位： | 浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江大学,浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江大学生物系统工程与食品科学学院 |
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| 基金项目： | 浙江省重点科技创新团队项目资助（2011R50029） |
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| 摘 要： | 目的研究一种快速、稳定地检测水产中孔雀石绿残留的方法。方法基于胶体金免疫层析技术,采用竞争法,以硝酸纤维素(nitrocellulose,NC)膜为载体,以孔雀石绿单克隆抗体为标记蛋白,制备一种金标免疫层析试纸条用于渔药残留快速检测,同时用免疫金银染色法提高试纸条的灵敏度。结果该检测系统选用20nm直径的胶体金用于标记抗体,最适p H为9.0,最适蛋白结合量为每1 m L胶体金结合15μg抗体蛋白。标记成功的抗体以1:10比例稀释并取20μL固定到用PBS(0.01 mol/L,10%蔗糖,0.05%吐温-20)预处理过的玻纤膜上,作为金标垫。用于包被NC膜的抗原与二抗浓度分别为3 mg/m L和0.7 mg/m L。用免疫金银染色法放大显色信号,制备的试纸条检出限为0.2 ng/m L,并应用到实际鱼样的检测中。整个测试时间约为10 min。结论本方法重现性良好,且置于室温环境下保存90 d后仍稳定可靠,为水产品中孔雀石绿残留的快速检测提供了一条可行途径。
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| 关 键 词： | 孔雀石绿 食品安全快速检测 渔药残留 免疫层析 免疫金银染色法 |
| 收稿时间： | 2017/1/31 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/3/30 0:00:00 |
Rapid detection of malachite green residues in aquatic products with immunogold-silver staining method |
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| FU Lin-Feng,WANG Li,LOU Yue,JIAN Jin-Ming,GUO Xi-Shan and ZHU Song-Ming.Rapid detection of malachite green residues in aquatic products with immunogold-silver staining method[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2017,8(6):2146-2153. |
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| Authors: | FU Lin-Feng WANG Li LOU Yue JIAN Jin-Ming GUO Xi-Shan and ZHU Song-Ming |
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| Affiliation: | College of Biosystems Engineering and Food Science,Zhejiang University,College of Biosystems Engineering and Food Science,Zhejiang University,Zhejiang University,College of Biosystems Engineering and Food Science,Zhejiang University,College of Biosystems Engineering and Food Science,Zhejiang University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | malachite green (MG) rapid detection of food safety fishery drugs residue immunochromatography immunogold-silver Staining |
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