| 一种测定乙醇脱氢酶活性的循环催化流动分析法 |
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| 引用本文： | 王恒,李永生,高秀峰,田甜,林玉莲.一种测定乙醇脱氢酶活性的循环催化流动分析法[J].酿酒科技,2010(10). |
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| 作者姓名： | 王恒 李永生 高秀峰 田甜 林玉莲 |
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| 作者单位： | 1. 四川大学化学工程学院,四川,成都,610065
2. 四川大学华西基础医学与法医学院,四川,成都,610041 |
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| 摘 要： | 基于乙醇(EtOH)/乙醇脱氢酶(ADH)/氧化型辅酶I(NAD+)催化反应体系,建立了一种用于ADH活性测定的循环催化流动分析法(RCFA),并优选该测定体系的实验条件,得到如下参:Tris-HCl缓冲液浓度(pH 8.9)为0.1 mol/L.EtOH的浓度为15.6 mol/L,NAD+浓度为9.0 mmol/L,ADH用量20 μL/次,反应液流速为0.98 mL/min,反应液体积为2 mL;ADH的测定范围为0.6～50 U/L,检出限为0.14 U/L,相对标准偏差≤1.3%(n=11).RCFA法具有测定过程简便、快速、自动化特点,能对ADH催化反应过程进行连续循环检测,可对ADH活性变化实现动态研究.RCFA法使反应液循环不但节省了大量的试剂和酶量、降低了测定成本,而且循环测定时不存在人为误差,提高了测定结果的准确度.
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| 关 键 词： | 循环催化流动分析 乙醇脱氢酶 乙醇 氧化型辅酶I 酿酒酵母菌 |
A Recirculating-catalysis Flow Analytical Method for the Determination of the Activity of Alcohol Dehyrogenase |
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| WANG Heng,LI Yong-Sheng,GAO Xiu-Feng,TIAN Tian,LIN Yu-lian.A Recirculating-catalysis Flow Analytical Method for the Determination of the Activity of Alcohol Dehyrogenase[J].Liquor-making Science & Technology,2010(10). |
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| Authors: | WANG Heng LI Yong-Sheng GAO Xiu-Feng TIAN Tian LIN Yu-lian |
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