| 海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 吴晨烁,李晓月,秦明珍,严芬.海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达[J].食品与发酵工业,2019(3):77-82. |
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| 作者姓名： | 吴晨烁 李晓月 秦明珍 严芬 |
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| 作者单位： | 福州大学生物科学与工程学院 |
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| 基金项目： | 福建省财政厅项目(闽财指(2015)1297号);福建省省财政厅项目(闽财指(2014)1262号);福州市市级科技计划项目(2017X0035);校科技发展基金(2014-XQ-20);校科技发展基金(2013-XQ-28) |
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| 摘 要： | 从海洋来源的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.) B1基因组中克隆1个褐藻胶裂解酶基因,并在大肠杆菌中实现异源表达,分离纯化重组酶并研究其酶学性质。通过Touch down PCR与热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)从假交替单胞菌B1基因组中扩增到1个褐藻胶裂解酶基因(B1SM),将目的基因插入到p GEX-4T-1载体,转化到宿主大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli) BL21 (DE3)。结果显示,从菌株B1克隆得到褐藻胶裂解酶基因B1SM,序列长度为1 005 bp,编码334个氨基酸,理论等电点为8. 51,编码蛋白质的理论分子质量为37. 13 k Da。重组褐藻胶裂解酶B1SM的最适pH和温度分别为8. 0和25℃。该褐藻胶裂解酶在pH 7. 0～9. 0范围内,25℃下保温1 h,仍剩余60%以上活力,pH稳定性较好。在最适pH 8. 0和30℃下保温1 h重组酶仍剩余60%以上活力。该研究为褐藻胶裂解酶基因B1SM在E. coli BL21(DE3)中实现了异源表达,为褐藻胶裂解酶的制备和研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 褐藻胶裂解酶 假交替单胞菌 聚合酶链反应 |
Cloning and expression of the alginate lyase gene B1SM from marine Pseudoalteromonas sp. B1 |
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| WU Chenshuo,LI Xiaoyue,QIN Mingzhen,YAN Fen.Cloning and expression of the alginate lyase gene B1SM from marine Pseudoalteromonas sp. B1[J].Food and Fermentation Industries,2019(3):77-82. |
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| Authors: | WU Chenshuo LI Xiaoyue QIN Mingzhen YAN Fen |
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| Affiliation: | (College of Biological Science and Technology,Fuzhou University,Fuzhou 350108,China) |
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| Abstract: | WU Chenshuo;LI Xiaoyue;QIN Mingzhen;YAN Fen(College of Biological Science and Technology,Fuzhou University,Fuzhou 350108,China) |
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| Keywords: | alginate lyase Pseudoalteromonas sp polymerase chain reaction(PCR) |
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