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黄曲霉毒素B1人工抗原及鼠源多克隆抗血清的制备
引用本文:王磊,胡骁飞,职爱民,刘庆堂,孙亚宁,邓瑞广.黄曲霉毒素B1人工抗原及鼠源多克隆抗血清的制备[J].食品科技,2011(3):277-281.
作者姓名:王磊  胡骁飞  职爱民  刘庆堂  孙亚宁  邓瑞广
作者单位:河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室;河南科技大学食品与生物工程学院
基金项目:“十一五”国家科技支撑计划项目(2006BAK02A21);河南省基础与前沿技术研究计划项目(092300410028)
摘    要:目的:研究合成并鉴定了黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源AFB1多克隆抗血清。方法:采用N-羟琥珀酰亚胺酯(N-hydroxy-succinimide NHS)法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原AFB1-BSA和包被抗原AFB1-OVA,采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定,通过动物免疫实验获得鼠源多抗血清,并使用间接ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行了鉴定。结果:结果表明半抗原AFB1分别和载体蛋白BSA及OVA偶联成功;免疫的6只小鼠效价均达1×10-4以上,3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50% inhibitive concentration,IC50)为8.199ng/mL。结论:实验成功合成了AFB1人工抗原,并生产了高效价、高敏感性的鼠源多克隆抗体血清,为AFB1单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了坚实的基础。

关 键 词:黄曲霉毒素B1  免疫原制备  合成  多抗血清  ELISA

Preparation and identification of Aflatoxin B1 artificial antigen and its mice polyclonal antiserum
WANG Lei,HU Xiao-fei,ZHI Ai-min,LIU Qing-tang,SUN Ya-nig,Deng Rui-guang.Preparation and identification of Aflatoxin B1 artificial antigen and its mice polyclonal antiserum[J].Food Science and Technology,2011(3):277-281.
Authors:WANG Lei  HU Xiao-fei  ZHI Ai-min  LIU Qing-tang  SUN Ya-nig  Deng Rui-guang
Affiliation:1(1.Key Laboratory for Animal Immunology of the Ministry of Agriculture,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002;2.Food and Bioengineering College,Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003)
Abstract:
Keywords:
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