芽孢杆菌胞内丝氨酸蛋白酶ISPr的克隆表达及脱毛应用

蛋白酶广泛应用于洗涤剂、食品加工、制革和羽毛降解等行业。本研究以从新疆的盐碱地土壤中筛选出的高产蛋白酶菌株LCB10为出发菌株。一种新的胞内丝氨酸蛋白酶ISPr,通过PCR技术扩增出目的基因片段,将获得的目的基因与大肠杆菌表达载体p ET30a连接,构建重组表达载体p ET30a-ispr。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)得到基因工程菌。在37℃下,用IPTG诱导ISPr的表达。酶谱法和蛋白酶活力测定结果表明该丝氨酸蛋白酶在大肠杆菌中表达。ISPr的相对分子质量约为35k D,在7%的Na Cl浓度下,具有86%的蛋白酶活力。将蛋白酶ISPr应用于山羊皮的脱毛,初步结果显示该蛋白酶具有脱毛效果。