人乳铁蛋白基因山羊乳腺特异性表达载体的构建

人乳铁蛋白（human lactoferrin，hLf）是一种铁结合性糖蛋白，具有多种重要的生理功能，因其巨大的经济价值和使用价值而引起广泛关注。目前已在小鼠、奶牛、昆虫、烟草等系统中表达了重组的人乳铁蛋白。但生产的hLf远远不能满足市场需求，鉴于乳腺反应器的优越性，所以应用基因工程大量生产乳腺特异性表达的hLf具有重要的实际意义。本研究先将hLf进行分子克隆，然后经限制性内切酶PmeI切割和胶回收获得hLf片断，与此同时，将真核表达载体pBCI用限制性内切酶XhoI消化并进行末端修饰，然后将其与hLf片断进行连接，最后将连接产物转化大肠杆菌并筛选阳性重组子。经PCR鉴定和限制性内切酶分析，结果表明成功构建了含有山羊乳腺细胞特异性表达启动子β-casein promoter的人乳铁蛋白基因真核表达载体pBC I-hLf，这就为hLf在乳腺组织中的特异性表达奠定了基础。。