| 人乳头瘤病毒31型L1病毒样颗粒在毕赤酵母中的表达及其免疫原性初步评价 |
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| 引用本文： | 蔡蓓蓓,王文伟,仝光杰,王蓓,楼觉人,胡海涛.人乳头瘤病毒31型L1病毒样颗粒在毕赤酵母中的表达及其免疫原性初步评价[J].粉末涂料与涂装,2019(10). |
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| 作者姓名： | 蔡蓓蓓 王文伟 仝光杰 王蓓 楼觉人 胡海涛 |
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| 作者单位： | 上海生物制品研究所有限责任公司 |
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| 摘 要： | 目的在毕赤酵母中表达人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)31型L1病毒样颗粒(virus-like particles,VLP),并初步评价其免疫原性。方法构建HPV31 L1四拷贝重组表达质粒,电转化毕赤酵母KM71,甲醇诱导表达蛋白。将重组菌经30 L发酵罐发酵,产物分离纯化,用纯化样品免疫小鼠,采用半数有效剂量(median effective dose,ED50)初步评价表达产物的免疫原性。结果经双酶切鉴定,四拷贝重组表达质粒构建正确。表达产物可与小鼠抗HPV L1单抗发生特异性结合。纯化产物在透射电镜下为直径60 nm的VLP结构,相对分子质量约55 000,纯度达95%以上。小鼠体内效价ED50值为0. 018μg。结论成功在毕赤酵母中表达了HPV31型L1 VLP,其在小鼠体内具有良好的免疫原性。
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| 关 键 词： | 人乳头瘤病毒 病毒样颗粒 毕赤酵母 基因重组 蛋白表达 |
Expression of human papillomavirus 31 L1 virus-like particles in Pichia pastoris and immunogenicity of expressed product |
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