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人肺癌ILK基因siRNA重组表达质粒的构建及其对A549细胞增殖的影响
引用本文:陈炎,胡海燕,刘革力,张璐渝,陈全.人肺癌ILK基因siRNA重组表达质粒的构建及其对A549细胞增殖的影响[J].粉末涂料与涂装,2012,25(10):1295-1298.
作者姓名:陈炎  胡海燕  刘革力  张璐渝  陈全
作者单位:1. 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆,400016
2. 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆400016;重庆医科大学基础医学院免疫学教研室,重庆400016
摘    要:目的构建人肺癌整合素连接激酶(Integrin-linked kinase,ILK)基因siRNA重组表达质粒,并检测其对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法人工合成靶向ILK基因的siRNA干扰序列,克隆至载体pGenesil-1中,构建重组表达质粒pGenesil-1-ILK,利用脂质体转染A549细胞,经G418稳定筛选后,采用RT-PCR和Western blot检测细胞中ILK基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平,MTT法检测细胞的增殖活力。结果重组表达质粒pGenesil-1-ILK经SalⅠ单酶切及测序证明构建正确,其转染A549细胞后,细胞ILK基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05),且细胞的增殖能力也显著降低(P<0.05)。结论成功构建了人ILK基因siRNA重组表达质粒,ILK基因沉默可显著抑制A549细胞增殖,为肺癌靶向基因治疗的研究提供了新的思路。

关 键 词:肺癌  ILK基因  RNA干扰  A549细胞  细胞增殖

Construction of recombinant siRNA expression vector for ILK gene of human lung cancer and its effect on proliferation of A549 cells
Abstract:
Keywords:Lung cancer  ILK gene  RNA interference  A549 cells  Cell proliferation
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