川西高原黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C基因的原核表达 |
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引用本文: | 张庆莲,刘浩浩,贺庆华,刘东奇,李蒙,梁正旭.川西高原黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C基因的原核表达[J].Canadian Metallurgical Quarterly,2011,39(14). |
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作者姓名: | 张庆莲 刘浩浩 贺庆华 刘东奇 李蒙 梁正旭 |
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作者单位: | 1. 成都医学院检验医学院临床生化教研室,四川成都,610083 2. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,610041 3. 四川省阿坝县畜牧兽医局,四川阿坝州,624000 |
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基金项目: | 四川省应用基础研究,国家自然科学基金,国家民委资助课题 |
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摘 要: | 目的]研究黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C(LDH-C)基因的原核表达及重组蛋白的纯化.方法]采用RT-PCR方法克隆鼠兔LDH-C基因,并将其连接到表达载体pET-32a上,构建鼠兔LDH-C基因的大肠杆菌BL21(DE3)工程菌,通过IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE进行分析,使用亲和层析方法进行蛋白纯化.结果]RT-PCR扩增出1条约1.0 kbp的条带,与预期结果相符;重组表达载体经PCR和双酶切鉴定,产生1个约1.0 kbp的目的片段,表明表达载体构建成功;表达产物经SDS-PAGE分析,得到了分子量略大于45.0kDa以包涵体形式存在的融合蛋白;通过镍亲和层析柱进行纯化,得到了较纯的融合蛋白.结论]黑唇鼠兔LDH-C基因被成功克隆和表达.
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关 键 词: | 黑唇鼠兔 乳酸脱氢酶C 原核表达 蛋白纯化 |
Prokaryotic Expression of Lactate Dehydrogenase C of Black-Lipped Pika in Western Sichuan Plateau |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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