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百合叶片总RNA提取方法比较及优化
引用本文:尹慧,陈莉,李晓艳,陈秋明,义鸣放.百合叶片总RNA提取方法比较及优化[J].中国农业大学学报,2008,13(4).
作者姓名:尹慧  陈莉  李晓艳  陈秋明  义鸣放
作者单位:中国农业大学,农学与生物技术学院,北京,100193
摘    要:为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂’组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果。结果表明:不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染。针对百合叶片组织富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNaseⅠ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA。采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为1.5。RT-PCR结果表明,改进的CTAB法提取的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。

关 键 词:百合  叶片  RNA提取  CTAB改进法  多糖  RT-PCR  百合  提取  方法  比较  优化  lily  leaves  extraction  improvement  生物学实验  分子克隆  表达分析  基因  电泳  比值  紫外光谱分析  沉淀  LiCl  除蛋白  抽提

Analysis and improvement of high-quality RNA extraction in leaves of lily
YIN Hui,CHEN Li,LI Xiao-yan,CHEN Qiu-ming,YI Ming-fang.Analysis and improvement of high-quality RNA extraction in leaves of lily[J].Journal of China Agricultural University,2008,13(4).
Authors:YIN Hui  CHEN Li  LI Xiao-yan  CHEN Qiu-ming  YI Ming-fang
Abstract:
Keywords:
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