| 鸡传染性支气管炎病毒E蛋白真核表达载体的构建及其产物抗原性的鉴定 |
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| 引用本文： | 袁园,张愉,张丽华,范文胜,韦天超,黄腾,磨美兰,韦平.鸡传染性支气管炎病毒E蛋白真核表达载体的构建及其产物抗原性的鉴定[J].畜牧与兽医,2019(11):109-113. |
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| 作者姓名： | 袁园 张愉 张丽华 范文胜 韦天超 黄腾 磨美兰 韦平 |
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| 作者单位： | 广西大学动物科学技术学院 |
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| 摘 要： | 以鸡传染性支气管炎病毒(IBV)GX-YL5毒株为模板,PCR扩增其E基因并克隆至融合有His标签的杆状病毒转移载体pFastBac~(TM)/HBM-TOPO,构建重组转移载体pFastBac~(TM)/HBM-TOPO-E,转化DH10Bac~(TM)感受态,经同源重组后转染Sf9细胞,并应用间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot进行鉴定。IFA结果表明融合了E蛋白的表达产物可被抗His标签的鼠单克隆抗体识别,在感染的细胞膜表面呈现强的黄绿色荧光;Western blot结果显示融合了E蛋白的表达产物既可被抗His标签的鼠单克隆抗体识别,也可被GX-YL5株的多抗血清特异性识别,且二者的目的条带大小均为16 ku。说明本研究已成功在Sf9细胞中表达了E蛋白,且表达产物抗原性良好,为进一步探讨IBV E蛋白的生物学功能和构建病毒样颗粒提供了基础。
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| 关 键 词： | 传染性支气管炎病毒 E蛋白 真核表达 重组杆状病毒 |
Construction of an eukaryotic expression vector for the E protein of avian infectious bronchitis virus and the antigenicity analysis of the expressed protein |
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