| 猪猝死症4种重要病原多重连接探针扩增鉴别检测技术的建立与应用 |
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| 引用本文： | 周莹珊,陈琳,孙静,姜胜,邵春艳,周彬,宋泉江,黄保续,王晓杜,宋厚辉.猪猝死症4种重要病原多重连接探针扩增鉴别检测技术的建立与应用[J].中国预防兽医学报,2019(2):161-167. |
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| 作者姓名： | 周莹珊 陈琳 孙静 姜胜 邵春艳 周彬 宋泉江 黄保续 王晓杜 宋厚辉 |
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| 作者单位： | 浙江农林大学动物科技学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室;中国动物卫生与流行病学中心 |
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| 基金项目： | 科技部国家重点研发计划重大动物源性病原体传入风险评估和预警技术研究(2017YFC1200500);浙江省科技重点研发计划项目(2018C02028;2019C02043);浙江省基础公益研究计划(LGN18C180001) |
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| 摘 要： | 为了快速检测引起猪猝死的病原,本研究针对临床引起猪猝死症的4种疾病病原(猪尼帕病毒、非洲猪瘟病毒、猪产气荚膜梭菌和猪胸膜肺炎放线杆菌)分别设计特异性探针,建立了同时检测这4种病原的多重连接探针扩增技术(MLPA)。对扩增产物进行毛细管电泳分析,结果显示该方法,探针之间没有交叉反应,特异性强。对不同病原核酸的最低检测限可以达到140拷贝μ/L～370拷贝μ/L,敏感性较高。应用该MLPA方法对129份临床样品进行检测,并与国家相关标准进行比较。结果显示,两种方法的符合率为100%,且该方法检测猪产气荚膜梭菌和猪胸膜肺炎放线杆菌的特异性和敏感性均达到100%,Kappa值均为1。该方法的检测结果与国家或行业标准PCR的检测结果一致性较高,且克服了后者无法同时进行多重检测的缺点,最多可以同时检测45种病原,对于复杂症候群的快速和高通量检测具有重要临床意义。该方法可推广到其它多重病原体的检测中,显示出广阔的应用前景。
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| 关 键 词： | 多重连接探针扩增技术(MLPA) 猪猝死症 多重检测 |
Simultaneous identification of pathogens causing porcine sudden death syndrome by using multiplex ligation-dependent probe amplification assay |
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| ZHOU Ying-shan,CHEN Lin,SUN Jing,JIANG Sheng,SHAO Chun-yan,ZHOU Bin,SONG Quan-jiang,HUANG Bao-xu,WANG Xiao-du,SONG Hou-hui.Simultaneous identification of pathogens causing porcine sudden death syndrome by using multiplex ligation-dependent probe amplification assay[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(2):161-167. |
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| Authors: | ZHOU Ying-shan CHEN Lin SUN Jing JIANG Sheng SHAO Chun-yan ZHOU Bin SONG Quan-jiang HUANG Bao-xu WANG Xiao-du SONG Hou-hui |
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| Affiliation: | (College of Animal Science and Technology,Key Laboratory of Applied Technology on Green-Eco-Healthy Animal Husbandry of ZhejiangProvince,Zhejiang Provincial Engineering Laboratory for Animal Health Inspection and Internet Technology. Zhejiang A&F University,Hangzhou 311300,China;China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao 266032,China) |
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| Abstract: | ZHOU Ying-shan;CHEN Lin;SUN Jing;JIANG Sheng;SHAO Chun-yan;ZHOU Bin;SONG Quan-jiang;HUANG Bao-xu;WANG Xiao-du;SONG Hou-hui(College of Animal Science and Technology,Key Laboratory of Applied Technology on Green-Eco-Healthy Animal Husbandry of ZhejiangProvince,Zhejiang Provincial Engineering Laboratory for Animal Health Inspection and Internet Technology. Zhejiang A&F University,Hangzhou 311300,China;China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao 266032,China) |
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| Keywords: | multiplex ligation-dependent probe amplification porcine sudden death syndrome multiplex detection |
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