| 禽呼肠孤病毒σB和σC蛋白在昆虫细胞中的共表达 |
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| 引用本文： | 王盛,谢芝勋,沈文康,谢丽基,范晴,罗思思,张艳芳,曾婷婷,黄娇玲,张民秀,谢志勤,邓显文.禽呼肠孤病毒σB和σC蛋白在昆虫细胞中的共表达[J].中国畜牧兽医,2020,47(5):1334-1341. |
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| 作者姓名： | 王盛 谢芝勋 沈文康 谢丽基 范晴 罗思思 张艳芳 曾婷婷 黄娇玲 张民秀 谢志勤 邓显文 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区兽医研究所, 广西兽医生物技术重点实验室, 南宁 530001 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金项目（2018GXNSFAA138106）；广西自然科学基金项目（2017GXNSFBA198140）；广西科技基地和人才专项（桂科AD17195083）；广西"八桂学者"专项（2019.79）；国家"万人计划"领军人才专项（W02060083） |
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| 摘 要： | 本研究旨在获得具有天然构象和活性良好的禽呼肠孤病毒（ARV）σB和σC蛋白，采用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中共表达σB和σC蛋白，并对其活性进行鉴定。根据NCBI数据库中ARV σB和σC基因序列设计引物，将两个基因克隆至pFast-Dual载体，转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞，筛选获得重组穿梭杆粒。通过转染sf9细胞，筛选到含有σB和σC基因的重组病毒。将重组病毒感染sf9细胞，通过优化接毒量和收获时间等参数，确定最佳表达条件，在sf9细胞中高效共表达σB和σC蛋白。Western blotting和间接免疫荧光（IFA）检测结果表明，成功在sf9细胞中共表达了ARV σB和σC蛋白，并具有很好的生物学活性。本试验结果为开发鉴别诊断试剂以及ARV颗粒疫苗的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 禽呼肠孤病毒(ARV) σB基因 σC基因 杆状病毒表达系统 sf9细胞 |
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