| mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证 |
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| 引用本文： | 熊发前,刘俊仙,王丛丛,贺梁琼,韩柱强,蒋菁,钟瑞春,李忠,唐秀梅.mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证[J].广西农业科学,2013(11):1781-1784. |
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| 作者姓名： | 熊发前 刘俊仙 王丛丛 贺梁琼 韩柱强 蒋菁 钟瑞春 李忠 唐秀梅 |
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| 作者单位： | [1]广西农业科学院经济作物研究所,南宁530007 [2]广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,南宁530007 [3]广西农业科学院甘蔗研究所,南宁530007 [4]件恺农业工程学院,广州510225 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31240059）;广西农业科学院科技发展基金项目（桂农科2013JQ05） |
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| 摘 要： | 目的]探讨花生不同组织部位RNA提取方法,为开展花生分子生物学研究奠定基础.方法]在CTAB法的基础上,设计一种改良的mCTAB-dLiC1法,其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖,使用两次10.0 mol/L的LiC1沉淀RNA,采用琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,核酸蛋白分析仪测定RNA纯度,并通过逆转录、RT-PCR和cDNA-SCoT验证其质量.结果]采用mCTAB-dLiC1法的RNA产率为554.80 μg/g,RNA的A260/A280比率为1.89,RNA非变性琼脂糖凝胶电泳未出现可见的DNA条带;扩增的28S和18S条带比值为2∶1,且条带清晰无拖尾现象;提取的RNA通过逆转录、RT-PCR扩增和cDNA-SCoT扩增验证,均获得较好的扩增效果,获得的RNA和cDNA质量好.结论]mCTAB-dLiCl RNA提取方法是一种高效提取花生各组织部位RNA的方法,可在花生分子生物学研究中应用.
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| 关 键 词： | 花生 RNA提取 mCTAB-dLiCl法 组织部位 |
mCTAB-dLiCl method for efficiently extracting RNA from various tissues of cultivated peanuts and its vertification |
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| Affiliation: | XIONG Fa-qian,LIU Jun-xian,WANG Cong-cong,HE Liang-qiong,HAN Zhu-qiang,JIANG Jing,ZHONG Rui-chun( 1.Cash Crops Research Institute, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530007, China; Guangxi Crop Genetic Improvement and Biotechnology Laboratory, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530007, China; 2.Guangxi Sugarcane Research Institute, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530007, China; 3.Zhongkai University of Agriculture and Engineering, Guangzhou 510225, China;) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | peanut RNA extraction modified CTAB-double LiCl method tissue |
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