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| 单叶省藤三种组织RNA提取和全长cDNA文库构建 | |
| 引用本文： | 杨帆,李发根,翁启杰,李梅,洪亚辉,甘四明.单叶省藤三种组织RNA提取和全长cDNA文库构建[J].分子植物育种,2010,8(4):800-803. |
| 作者姓名： | 杨帆 李发根 翁启杰 李梅 洪亚辉 甘四明 |
| 作者单位： | 1. 中国林业科学研究院热带林业研究所,广州,510520;湖南农业大学生物科学技术学院,长沙,410128 2. 中国林业科学研究院热带林业研究所,广州,510520 3. 湖南农业大学生物科学技术学院,长沙,410128 |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目，国家高技术研究发展计划重点项目 |
| 摘 要： | 本实验比较了3种RNA提取方法提取单叶省藤的茎、雄花序和根的结果,改良CTAB法和Trizol法提取的RNA无明显降解、完整性好,均可用于cDNA文库构建,而异硫氰酸胍法提取的RNA降解严重;考虑到改良CTAB法成本较低,故推荐为首选方法。将茎、雄花序和根三种组织的RNA等量混合后,利用SMART策略构建了全长cDNA文库;通过涂平板培养后的菌落计数,测得初库滴度为2.91×105cfu/μL;从培养平板上随机挑取16个菌落进行PCR检测,文库重组率为87.5%,插入片段平均长度为1.5kb左右。所建文库的质量可靠,为下一步的EST测序和候选基因发现提供了材料基础。 |
| 关 键 词： | 单叶省藤 RNA提取 cDNA文库 |
Comparison of Three RNA Isolation Methods for Three Tissues of Calamus simplicifolius and Construction of a Full-length cDNA Library |
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| Yang Fan,Li Fagen,Weng Qijie,Li Mei,Hong Yahui,Gan Siming.Comparison of Three RNA Isolation Methods for Three Tissues of Calamus simplicifolius and Construction of a Full-length cDNA Library[J].Molecular Plant Breeding,2010,8(4):800-803. | |
| Authors: | Yang Fan Li Fagen Weng Qijie Li Mei Hong Yahui Gan Siming |
| Abstract: | |
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