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人IGF-1基因重组杆状病毒表达载体的构建及在sf9细胞中的表达
引用本文:孙丽翠,王雅梅,闫豫东,张静宜,司杨,王民,祁雅慧.人IGF-1基因重组杆状病毒表达载体的构建及在sf9细胞中的表达[J].农业生物技术学报,2005,13(4):452-455.
作者姓名:孙丽翠  王雅梅  闫豫东  张静宜  司杨  王民  祁雅慧
作者单位:首都医科大学实验中心,北京,100054
基金项目:北京市科委科技合同资金项目(No.954024800)资助.
摘    要:以pcDNA3.1/IGF-1为模板,采用PCR方法对IGF-1基因进行扩增,EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ酶切回收含IGF-1基因的DNA片段,与pFastHTA连接,获得重组载体pFast/IGF-1;将其转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH10Bac感受态细胞,经卡那霉素、四环素、庆大霉素及蓝白斑筛选得到重组杆状病毒载体pBacmid-Fa-IGF-1,PCR鉴定得到单-/GF-1条带。将该病毒载体转染sf9细胞,进行病毒重组,Western-blot检测/GF-1表达,并用MTT法检测促内皮细胞生长活性。结果成功获得了重组病毒,Western-blot检测出现1条约13.0kD的带,MTT法检测IGF-1促细胞生长率为24.4%。

关 键 词:人IGF-1基因  重组杆状病毒载体  sf9细胞  IGF-1基因  杆状病毒表达载体  基因重组  Western-blot  pcDNA3.1  杆状病毒载体  细胞生长率
收稿时间:2004-06-01
修稿时间:2004-10-12

Construction of IGF-1 Recombinant Baculovirus Expressive Vector and Its Expression in sf9 Cells
SUN Li-Cui,WANG Ya-Mei,YAN Yu-Dong,ZHANG Jing-Yi,SI Yang,WANG Min,QI Ya-Hui.Construction of IGF-1 Recombinant Baculovirus Expressive Vector and Its Expression in sf9 Cells[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2005,13(4):452-455.
Authors:SUN Li-Cui  WANG Ya-Mei  YAN Yu-Dong  ZHANG Jing-Yi  SI Yang  WANG Min  QI Ya-Hui
Abstract:
Keywords:human IGF-1 gene  recombinant baculovirus vector  sf9 cells
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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