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苏云金杆菌4.0718菌株InhA的鉴定和不同生长时期的表达分析
引用本文:李小辉,夏立秋,袁灿,丁学知,尹佳.苏云金杆菌4.0718菌株InhA的鉴定和不同生长时期的表达分析[J].湖南师范大学自然科学学报,2008,31(2).
作者姓名:李小辉  夏立秋  袁灿  丁学知  尹佳
作者单位:湖南师范大学生命科学学院,微生物分子生物学湖南省重点实验室,中国长沙,410081
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) , 国家自然科学基金 , 高等学校博士学科点专项科研项目 , 湖南省自然科学基金
摘    要:免疫抑制因子A (Immune Inhibitor A, InhA)是苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)分泌的一种锌金属蛋白酶,具有水解昆虫抗菌肽的活性.为了研究InhA在Bt 4.0718菌株中的重要功能,利用SDS-PAGE分离了Bt 4.0718菌株营养生长中期、芽胞早期和芽胞晚期的细胞总蛋白质,通过MALDI-TOF/TOF MS分析以及数据库搜索,鉴定到了相对分子质量为86.5kD、pI为5.37的InhA蛋白质.然后采用双向电泳(2-DE)技术检测该蛋白质在不同时期表达量的差异,发现分离和鉴定到的InhA及相对分子质量为75kD、pI为5.13的InhA precursor蛋白质在营养生长中期的表达量比较高,说明InhA在营养生长中期前已开始形成,直到芽胞早期达最大表达量,但芽胞晚期的图谱分析和质谱鉴定均未发现InhA. InhA在营养期的高效表达说明:Bt进入昆虫体内后,InhA在Bt细胞生长繁殖初期表达,并抑制昆虫体内的抗菌肽对Bt细胞的裂解作用,从而有助于Bt在昆虫宿主中的生存,为芽胞期晶体和芽胞的形成以及菌株毒力的发挥奠定了基础.

关 键 词:苏云金芽胞杆菌  InhA  双向电泳  MALDI-TOF/TOF  MS  毒力

Identification of InhA and Analysis on Its Expression at Different Phases of Bacillus thuringiensis Strain 4.0718
LI Xiao-hui,XIA Li-qiu,YUAN Can,DING Xue-zhi,YIN Jia.Identification of InhA and Analysis on Its Expression at Different Phases of Bacillus thuringiensis Strain 4.0718[J].Journal of Natural Science of Hunan Normal University,2008,31(2).
Authors:LI Xiao-hui  XIA Li-qiu  YUAN Can  DING Xue-zhi  YIN Jia
Abstract:
Keywords:
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