| 大鼠原代肝细胞的标记和移植方法 |
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| 引用本文： | 杨军英,王建设,刘慧兵,李涛,刘芳.大鼠原代肝细胞的标记和移植方法[J].西北师范大学学报,2014(4). |
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| 作者姓名： | 杨军英 王建设 刘慧兵 李涛 刘芳 |
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| 作者单位： | 河南师范大学体育学院;河南师范大学省部共建细胞分化调控重点实验室; |
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| 基金项目： | 河南省基础研究与前沿项目(122300410253) |
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| 摘 要： | 探讨CM-DiI标记大鼠原代肝细胞的最佳浓度、细胞的移植量和移植途径.采用原位胶原酶灌注和密度梯度离心法分离、纯化大鼠肝细胞,用不同浓度CM-DiI进行标记,筛选出CM-DiI的最佳标记浓度,分别从门静脉、尾静脉移植到2/3肝切除0h大鼠,对细胞移植36h后的肝组织石蜡切片和冰冻切片分别进行免疫组织化学分析和荧光观察.结果显示,4μmol·mL-1浓度的CM-DiI和肝细胞孵育5min,细胞标记率高达95%.每克大鼠残肝移植0.8mL的细胞悬液(107个·mL-1)和0.2,0.4,0.6mL移植后检测到的标记细胞数目相比有显著性差异(P0.01),经肝门静脉移植后可以检测到的标记细胞数比尾静脉多(P0.01).CM-DiI标记大鼠原代肝细胞的最佳浓度为4μmol·mL-1,标记细胞的最佳移植量为每克大鼠残肝移植0.8mL的细胞悬液(107个·mL-1)、最佳移植途径为经肝门静脉移植.
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| 关 键 词： | 大鼠 原代肝细胞 细胞移植 标记率 移植途径 |
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