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α-半乳糖神经酰胺负载DC促进CIK细胞对肝癌细胞的杀伤效应
引用本文:刘红彦,张颖,王晶波,陈莉,王惠,李栋,盖中涛.α-半乳糖神经酰胺负载DC促进CIK细胞对肝癌细胞的杀伤效应[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2016,23(2):175-181.
作者姓名:刘红彦  张颖  王晶波  陈莉  王惠  李栋  盖中涛
作者单位:1. 山东大学医学院,山东济南,250100;2. 山东省千佛山医院重症医学科,山东济南,250014;3. 济南市传染病医院三科,山东济南,250021;4. 济南赛尔生物科技有限公司,山东济南,250101;5. 山东大学齐鲁儿童医院,山东济南,250022
基金项目:山东省科技发展计划资助项目(No. 2012GGA01219);济南市科技发展计划资助项目(No. 201302032);济南市2012年度科技型中小企业技术创新基金资助。
摘    要:目的:研究负载α-半乳糖神经酰胺(alpha-galactosylceramide,α-GalCer)的DC功能与成熟度的改变情况,探讨α-GalCer-DC与CIK共培养对CIK细胞表型、增殖活性及杀伤肝癌细胞效率的影响.方法:采用密度梯度离心法从人外周血中分离出单个核细胞,悬浮细胞诱导培养CIK细胞,贴壁细胞诱导培养DC;流式细胞仪检测α-GalCer负载DC的表型,Real-time PCR检测DC相关基因的mRNA表达改变.将α-GalCer-DC与CIK细胞共培养,流式细胞仪检测DC与CIK细胞表面标志物;锥虫蓝染色法检测CIK细胞的增殖倍数;Real-time PCR检测CIK细胞功能相关基因的表达情况;CCK-8试剂盒检测α-GalCer-DC对CIK杀伤HepG2细胞的影响.结果:经过多种细胞因子诱导,可获得CIK细胞和成熟的DC;α-GalCer负载可促进DC成熟,DC表面标志物CD80、CD86、CD83和CD11c的阳性率均升高(P<0.05或P<0.01),表面趋化因子受体CCR-7、IL-12、IL-10的mRNA水平升高(P<0.05).α-GalCer-DC与CIK共培养,可显著提高CIK细胞CD3+ CD56+的表达和增殖活性(P<0.05或P<0.01),并显著提高INF-γ、IL-12、穿孔素和颗粒酶素B的mRNA表达水平(P<0.05或P<0.01);CIK、DC-CIK、α-GalCer-DC-CIK细胞对HepG2细胞的杀伤作用随效靶比的升高而增强,在同一效靶比时α-GalCer-DC-CIK细胞对靶细胞的杀伤作用最强(P<0.05).结论:α-GalCer负载可促进DC成熟,α-GalCer-DC与CIK共培养能促进后者增殖和成熟,能显著增强其对肝癌细胞的杀伤活性,为DC-CIK在肿瘤免疫治疗中的应用提供了实验依据.

关 键 词:树突状细胞  细胞因子诱导的杀伤细胞  α-GalCer  肝癌  增殖  成熟  肿瘤杀伤活性
收稿时间:2015/11/20 0:00:00
修稿时间:2016/2/24 0:00:00

Cytotoxic effect of CIK cells promoted by alpha-galactosylceramide pulsed dendritic cells against hepatoma carcinoma cells
LIU Hongyan,ZHANG Ying,WANG Jingbo,CHEN Li,WANG Hui,LI Dong and GAI Zhongtao.Cytotoxic effect of CIK cells promoted by alpha-galactosylceramide pulsed dendritic cells against hepatoma carcinoma cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2016,23(2):175-181.
Authors:LIU Hongyan  ZHANG Ying  WANG Jingbo  CHEN Li  WANG Hui  LI Dong and GAI Zhongtao
Abstract:
Keywords:dendritic cell(DC)  cytokine induced killer(CIK) cell  α-galactosylceramide(α-GalCer)  hepatoma carcinoma  proliferation  maturation  tumor cytotoxic effect
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