| 趋化因子受体CXCR4及CCR5真核表达载体的构建及其在卵巢癌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 谢婷婷,魏莉,宋辉,于月成.趋化因子受体CXCR4及CCR5真核表达载体的构建及其在卵巢癌细胞中的表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(12). |
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| 作者姓名： | 谢婷婷 魏莉 宋辉 于月成 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建人CXCR4及CCR5真核表达重组质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,建立稳定转染细胞系并观察其表达效果。方法:从人外周血单个核细胞中提取RNA,采用反转录PCR技术扩增CXCR4及CCR5的基因编码序列,将序列克隆至真核表达载体pEGFP,经酶切和测序鉴定后,应用脂质体转染技术将质粒cancer.pEGFP-CXCR4和pEGFP-CCR5分别导入不表达CXCR4及CCR5蛋白的SKOV3细胞,经G418抗性筛选得到阳性细胞克隆并扩大培养成系。分别采用免疫荧光染色和流式细胞术方法(FCM)检测稳定转染细胞株CXCR4和CCR5的表达。结果:构建了真核表达载体pEG-FP-CXCR4和pEGFP-CCR5;得到了抗G418阳性细胞克隆;免疫荧光染色和FCM检测结果显示,转染质粒的SKOV3细胞表达CXCR4和CCR5。结论:成功建立稳定表达趋化因子受体CXCR4和CCR5的卵巢癌细胞株,为CXCR4和CCR5在卵巢癌中的研究工作提供依据及平台。
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| 关 键 词： | CXCR4 CCR5 转染 SKOV3细胞 |
Construction and expression of vectors carrying chemokine receptors CXCR4/CCR5 in SKOV3 cells |
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| XIE Ting-ting,WEI Li,SONG Hui,YU Yue-cheng.Construction and expression of vectors carrying chemokine receptors CXCR4/CCR5 in SKOV3 cells[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2010,26(12). |
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| Authors: | XIE Ting-ting WEI Li SONG Hui YU Yue-cheng |
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